24小时热门版块排行榜    

查看: 3710  |  回复: 21

tangchaoxi

新虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】质粒提取

提质粒出现四条带是什么情况?各位帮帮忙
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)



tangchaoxi(金币+1):谢谢参与
看具体多大了
震荡太厉害有可能把菌基因组弄断了也提出来
2楼2011-03-11 10:46:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)



tangchaoxi(金币+1):谢谢参与
肯定是提取过程中出现了问题,建议重新提取,污染杂菌等问题
3楼2011-03-11 11:14:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangchaoxi

新虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-03-11 11:14:52:
肯定是提取过程中出现了问题,建议重新提取,污染杂菌等问题

加了抗生素的,应该不会污染吧。就算污染了杂菌,怎么也正好有质粒呢
4楼2011-03-11 17:50:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangchaoxi

新虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2011-03-11 10:46:24:
看具体多大了
震荡太厉害有可能把菌基因组弄断了也提出来

那提取出来的就不能用了吧
5楼2011-03-11 17:51:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
tangchaoxi(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-03-16 09:43:20
提取的大小有多少呢?四条带的位置如何?最好把电泳图晒出来看看。我之前提取出来的质粒不止四条,酶切后就对了,奇怪。下一步能不能做,要看你具体做什么。pcr的话没问题,直接P就可以;要做酶切连接的话,切胶回收你的片段也没太大问题;转化之类的操作就不可以了。
6楼2011-03-11 20:16:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

翱宇

禁虫 (正式写手)



tangchaoxi(金币+1):谢谢参与
应该放置个图片来,另外建议楼主说明下,怎么提的质粒,是用柱子呢,还是碱法,怎么处理的等。
7楼2011-03-11 20:18:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weishengsu5

木虫 (正式写手)



tangchaoxi(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by tangchaoxi at 2011-03-11 10:44:20:
提质粒出现四条带是什么情况?各位帮帮忙

很可能就是染色体断裂
8楼2011-03-11 20:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabing0324

金虫 (职业作家)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-21 22:50:14
我的好多条带呢,操作也很轻柔了,后来单酶切,出现两条带,空载体和目的片段,这就好了,P也能P出条带,做定量也蛮好的,加油往下做吧,呵呵
9楼2011-03-12 22:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-21 22:50:30
原因肯定很多,注意碱裂解时间不能太长,否则对质粒质量影响很大
10楼2011-03-12 22:52:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxl_yll

木虫 (正式写手)


有三条带是正常的吧?
11楼2011-03-13 11:23:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghuiyanyx

金虫 (著名写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-03-16 09:43:39
这个原因很多方面,质粒本身大小,在细胞内的PCN,还有就是操作过程是否剧烈。总的来说,如果后续步骤对质粒质量要求不是那么严格,一般没问题。楼主要是不放心,就做个酶切看看。
12楼2011-03-13 11:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangchaoxi

新虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by wanghuiyanyx at 2011-03-13 11:35:54:
这个原因很多方面,质粒本身大小,在细胞内的PCN,还有就是操作过程是否剧烈。总的来说,如果后续步骤对质粒质量要求不是那么严格,一般没问题。楼主要是不放心,就做个酶切看看。

好的,谢谢呵呵!
13楼2011-03-16 09:22:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

-超越beyond

铁虫 (小有名气)


把图晒出来吧
14楼2011-03-20 17:36:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengjiezy114

新虫 (初入文坛)


楼主应该晒下图的,说一下大小。我提的一般都有两条带,听老师说提的质粒有很多形态,有时会多个条带是很正常的。
15楼2011-03-21 21:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★
scelab(金币+2): 热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2011-03-21 23:29:27
不同的质粒在没有经过酶切或其它方式处理的情况下,由于自身拓扑结构的差异出现一至四条带均为正常,质粒干净没有杂质不影响继续使用,,,
16楼2011-03-21 22:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
建议楼主上图分析!
17楼2011-03-21 22:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangchaoxi

新虫 (小有名气)


问题已经解决了,谢谢各位!
18楼2011-03-22 08:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengna9981

铜虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有断裂的吧 或者是基因组
19楼2011-03-22 09:19:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyw30000

铜虫 (小有名气)


提出基因组了,下次操作时动作小一点
20楼2011-03-23 17:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyy2005bne

新虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也曾经跑出来过4条带,师姐说她们称为鬼带。没什么影响,可以继续做做试试看
21楼2011-04-01 17:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingcao3081

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得可能污染了!可以再试试!
22楼2011-04-01 17:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tangchaoxi 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然评审意见 +7 wangmingqi 2026-08-28 8/400 2026-08-28 18:42 by zhuzg0628
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +11 Kittylucky 2026-08-27 12/600 2026-08-28 16:26 by lyxiaomc
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +3 bud_bud 2026-08-27 6/300 2026-08-28 11:53 by bud_bud
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见