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[交流]
【求助/交流】试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,求帮忙分析一下
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试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,是不是偏高了，DNA纯度可以用来做后续的PCR实验吗？原因是什么？求帮忙分析~附质粒提取的电泳图 |
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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dingjunrong(金币+5): 2011-03-29 09:26:43
dhd997(金币+5): good。看你经常出现，很热心，想当版主吗？考虑一下？ 2011-03-30 08:18:35
dhd997(金币+5): good。看你经常出现，很热心，想当版主吗？考虑一下？ 2011-03-30 08:18:54
dingjunrong(金币+5): 2011-03-29 09:26:43
dhd997(金币+5): good。看你经常出现，很热心，想当版主吗？考虑一下？ 2011-03-30 08:18:35
dhd997(金币+5): good。看你经常出现，很热心，想当版主吗？考虑一下？ 2011-03-30 08:18:54
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A260/A280的范围在1.8~2.0比较好，但这只是一般的说法，不用太纠结。 PCR对模板要求并不高。我们实验室用质粒作模板的话，只需碱裂解法手提，跑胶看到有条带就去PCR了，没见出过什么问题。 试剂盒提取的质粒纯度是有保证的，再说PCR本身也是一个很特异的反应，楼主不用担心质粒纯度问题。再说了，你提的浓度也很高。 一句话，你这质粒绝对绝对可以拿去做PCR的，1微升做模板就够了！ 唠叨句，以后你再提质粒，完全没必要去测OD的。 |
2楼2011-03-28 17:33:45
3楼2011-03-29 09:25:42
4楼2011-03-29 11:11:37
补充
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dhd997(金币+2): good 2011-03-30 08:18:54
dhd997(金币+2): good 2011-03-30 08:18:54
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这里有人详细说明了拷贝数计算的原理 还附了个直接在网页上计算拷贝数的工具，可以看看 http://www.bioask.cn/html/541.html |
5楼2011-03-29 22:34:15
