应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,求帮忙分析一下
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 2107  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,求帮忙分析一下

试剂盒提取重组质粒的A260/A280=2.08,是不是偏高了，DNA纯度可以用来做后续的PCR实验吗？原因是什么？求帮忙分析~附质粒提取的电泳图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-28 15:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by dingjunrong at 2011-03-29 09:25:42:
恩~~谢谢了，因为我后面要做荧光定量PCR，所以测了下浓度，顺便测了下吸光度，谢谢了~那请问大侠是否知道怎样将质粒的浓度转化为拷贝数呢

呵呵，汗颜了，不好意思，不知道是要做荧光定量PCR，嘿嘿~质粒是要做标准曲线吧？
绝对定量我没做过，下面是天根的荧光定量PCR培训教材里的：

质粒浓度(ng/ul)=OD260*50*稀释倍数
质粒分子量=碱基数*324
质粒拷贝数（copies/ul）=浓度/分子量*6*10^14 （10的14次方）

祝实验顺利!
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-29 11:11:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dingjunrong(金币+5): 2011-03-29 09:26:43
dhd997(金币+5): good。看你经常出现，很热心，想当版主吗？考虑一下？ 2011-03-30 08:18:35
dhd997(金币+5): good。看你经常出现，很热心，想当版主吗？考虑一下？ 2011-03-30 08:18:54
A260/A280的范围在1.8~2.0比较好，但这只是一般的说法，不用太纠结。
PCR对模板要求并不高。我们实验室用质粒作模板的话，只需碱裂解法手提，跑胶看到有条带就去PCR了，没见出过什么问题。
试剂盒提取的质粒纯度是有保证的，再说PCR本身也是一个很特异的反应，楼主不用担心质粒纯度问题。再说了，你提的浓度也很高。
一句话，你这质粒绝对绝对可以拿去做PCR的，1微升做模板就够了！
唠叨句，以后你再提质粒，完全没必要去测OD的。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-03-28 17:33:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjunrong

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-03-28 17:33:45:
A260/A280的范围在1.8~2.0比较好，但这只是一般的说法，不用太纠结。
PCR对模板要求并不高。我们实验室用质粒作模板的话，只需碱裂解法手提，跑胶看到有条带就去PCR了，没见出过什么问题。
试剂盒提取的质粒纯度 ...

恩~~谢谢了，因为我后面要做荧光定量PCR，所以测了下浓度，顺便测了下吸光度，谢谢了~那请问大侠是否知道怎样将质粒的浓度转化为拷贝数呢
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-29 09:25:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

补充

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-03-30 08:18:54
这里有人详细说明了拷贝数计算的原理
还附了个直接在网页上计算拷贝数的工具，可以看看
http://www.bioask.cn/html/541.html
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-03-29 22:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 211本科材料化工求调剂 +19 YHLAH 2026-04-11 23/1150 2026-04-14 22:25 by fenglj492
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +41 xaw. 2026-04-11 42/2100 2026-04-14 20:05 by honglizhao
[考研] 366求调剂 +11 不知名的小卅 2026-04-11 11/550 2026-04-14 15:50 by zs92450
[考研] 药学求调剂 +6 RussHu 2026-04-12 7/350 2026-04-14 15:16 by sxdj2
[考研] 求调剂，985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 一志愿华中农微生物，288分，三年实验经历 +11 代fish 2026-04-09 11/550 2026-04-12 10:21 by Hayaay
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 281求调剂 +11 觉得好的吧 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:35 by 逆水乘风
[考研] 085402通信工程调剂，有4项学科竞赛国奖（电赛国二），硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 考研调剂 +26 硕星赴 2026-04-09 27/1350 2026-04-10 22:24 by 猪会飞
[考研] 22408 366分，本科211，一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 一志愿矿大，材料工程专硕314分，0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 考研调剂-材料类-284 +28 想换手机不想解� 2026-04-08 28/1400 2026-04-09 20:08 by 倒数321?
[考研] 349学科化学045106求调剂，化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 招收有机化学、化工，药学，食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
[考研] 求调剂，现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭