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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 苯酚降解产物HPLC分离
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collins1204

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 苯酚降解产物HPLC分离

问题：用HPLC想分离苯酚，邻苯二酚，间苯二酚，对苯二酚，苯醌。
          配制标样混合后，
          流动相甲醇：水（或1%乙酸缓冲溶液），各种配比条件都试了
          检测波长：280，277，315都试了
          就是分不开，请问是怎么回事，麻烦懂的虫友给予指导！
          谢谢！
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不要问我从哪里来，我的故乡在远方
1楼2012-04-05 10:19:34
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

collins1204

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-04-05 11:35:20:
1、使用梯度
2、调控流动相pH
应该可以分离的。

PH就是使用乙酸缓冲或者其他的？
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不要问我从哪里来，我的故乡在远方
8楼2012-04-05 14:23:57
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vermouth325

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助~ 欢迎常来分析版~ ^^ 2012-04-05 16:12:33
引用回帖:
7楼: Originally posted by collins1204 at 2012-04-05 14:22:32:
谢谢，我马上试试

我的这个梯度是我们实验室做分析常用的，不一定完全适合你的，你先用这个试试，然后再根据出峰情况作相应修改就行了，希望能帮到你
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我在看得見你的角落，給你安全感
10楼2012-04-05 14:37:23
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vermouth325

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
collins1204: 金币+10, ★有帮助 2012-04-12 10:14:32
这几种物质的极性还是有差距的，是可以分开的，是不是你的梯度没设好，你试着改改梯度浓度和对应的时间看看行不行
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我在看得見你的角落，給你安全感
2楼2012-04-05 10:38:26
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collins1204

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-04-05 10:38:26:
这几种物质的极性还是有差距的，是可以分开的，是不是你的梯度没设好，你试着改改梯度浓度和对应的时间看看行不行

什么是浓度梯度和对应时间？麻烦详细说明一下
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不要问我从哪里来，我的故乡在远方
3楼2012-04-05 10:44:11
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hisensecao
4楼2012-04-05 11:02:25
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
collins1204: 金币+10, ★有帮助 2012-04-12 10:14:46
1、使用梯度
2、调控流动相pH
应该可以分离的。
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守候在风中的宁静。
5楼2012-04-05 11:35:20
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vermouth325

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
collins1204: 金币+6, ★有帮助 2012-04-05 14:22:44
引用回帖:
3楼: Originally posted by collins1204 at 2012-04-05 10:44:11:
什么是浓度梯度和对应时间？麻烦详细说明一下

用HPLC不是有等浓度洗脱和梯度洗脱么？？你用的是哪一种？一般梯度洗脱比较好，用梯度洗脱的时候就要设置“LC时间程序”，也就是对应的一个浓度洗脱多长时间，把我们实验室现在一般做分析用的梯度设置话给你参考下：
时间    单元        操作     值
0.01   pumps    B.conc    5
2.80   pumps    B.conc    80
3.60   pumps    B.conc    80
4.50   pumps    B.conc    100
5.50   pumps    B.conc    100
7.00   pumps    B.conc    5
8.00   controller  stop


其中那个初始浓度值5是可以改的，根据你测试的样品极性的大小可以改，如果改了后边由100%回到5%的那个5也要改
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我在看得見你的角落，給你安全感
6楼2012-04-05 13:49:51
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collins1204

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-04-05 13:49:51:
用HPLC不是有等浓度洗脱和梯度洗脱么？？你用的是哪一种？一般梯度洗脱比较好，用梯度洗脱的时候就要设置“LC时间程序”，也就是对应的一个浓度洗脱多长时间，把我们实验室现在一般做分析用的梯度设置话给你参考 ...

谢谢，我马上试试
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不要问我从哪里来，我的故乡在远方
7楼2012-04-05 14:22:32
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
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soundhorizo: 金币+2, ^^ 感谢应助 2012-04-05 16:12:49
引用回帖:
8楼: Originally posted by collins1204 at 2012-04-05 14:23:57:
PH就是使用乙酸缓冲或者其他的？

磷酸。乙酸。氨水。三乙胺。根据实际所需pH进行调节。pH对酸碱样品的保留时间影响较大。
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守候在风中的宁静。
9楼2012-04-05 14:30:11
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