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collins1204

至尊木虫 (著名写手)

应助: 26 (小学生)
金币: 17506.6
散金: 1796
红花: 10
帖子: 2475
在线: 1179.9小时
虫号: 948643
注册: 2010-01-26
性别: GG
专业: 环境工程

[求助] 苯酚降解产物HPLC分离

问题：用HPLC想分离苯酚，邻苯二酚，间苯二酚，对苯二酚，苯醌。
      配制标样混合后，
      流动相甲醇：水（或1%乙酸缓冲溶液），各种配比条件都试了
      检测波长：280，277，315都试了
      就是分不开，请问是怎么回事，麻烦懂的虫友给予指导！
      谢谢！

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1楼2012-04-05 10:19:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

vermouth325

木虫 (小有名气)

应助: 40 (小学生)
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红花: 2
帖子: 199
在线: 48.1小时
虫号: 1722387
注册: 2012-03-28
性别: MM
专业: 中药学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
collins1204: 金币+6, ★有帮助 2012-04-05 14:22:44

引用回帖:

3楼: Originally posted by collins1204 at 2012-04-05 10:44:11:
什么是浓度梯度和对应时间？麻烦详细说明一下

用HPLC不是有等浓度洗脱和梯度洗脱么？？你用的是哪一种？一般梯度洗脱比较好，用梯度洗脱的时候就要设置“LC时间程序”，也就是对应的一个浓度洗脱多长时间，把我们实验室现在一般做分析用的梯度设置话给你参考下：
时间单元操作值
0.01 pumps B.conc 5
2.80 pumps B.conc 80
3.60 pumps B.conc 80
4.50 pumps B.conc 100
5.50 pumps B.conc 100
7.00 pumps B.conc 5
8.00 controller stop

其中那个初始浓度值5是可以改的，根据你测试的样品极性的大小可以改，如果改了后边由100%回到5%的那个5也要改