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collins1204

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 苯酚降解产物HPLC分离

问题:用HPLC想分离苯酚,邻苯二酚,间苯二酚,对苯二酚,苯醌。
          配制标样混合后,
          流动相甲醇:水(或1%乙酸缓冲溶液),各种配比条件都试了
          检测波长:280,277,315都试了
          就是分不开,请问是怎么回事,麻烦懂的虫友给予指导!
          谢谢!
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不要问我从哪里来,我的故乡在远方
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collins1204

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-04-05 10:38:26:
这几种物质的极性还是有差距的,是可以分开的,是不是你的梯度没设好,你试着改改梯度浓度和对应的时间看看行不行

什么是浓度梯度和对应时间?麻烦详细说明一下
不要问我从哪里来,我的故乡在远方
3楼2012-04-05 10:44:11
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vermouth325

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
collins1204: 金币+10, 有帮助 2012-04-12 10:14:32
这几种物质的极性还是有差距的,是可以分开的,是不是你的梯度没设好,你试着改改梯度浓度和对应的时间看看行不行
我在看得見你的角落,給你安全感
2楼2012-04-05 10:38:26
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
collins1204: 金币+10, 有帮助 2012-04-12 10:14:46
1、使用梯度
2、调控流动相pH
应该可以分离的。
守候在风中的宁静。
5楼2012-04-05 11:35:20
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vermouth325

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
collins1204: 金币+6, 有帮助 2012-04-05 14:22:44
引用回帖:
3楼: Originally posted by collins1204 at 2012-04-05 10:44:11:
什么是浓度梯度和对应时间?麻烦详细说明一下

用HPLC不是有等浓度洗脱和梯度洗脱么??你用的是哪一种?一般梯度洗脱比较好,用梯度洗脱的时候就要设置“LC时间程序”,也就是对应的一个浓度洗脱多长时间,把我们实验室现在一般做分析用的梯度设置话给你参考下:
时间    单元        操作     值
0.01   pumps    B.conc    5
2.80   pumps    B.conc    80
3.60   pumps    B.conc    80
4.50   pumps    B.conc    100
5.50   pumps    B.conc    100
7.00   pumps    B.conc    5
8.00   controller  stop


其中那个初始浓度值5是可以改的,根据你测试的样品极性的大小可以改,如果改了后边由100%回到5%的那个5也要改
我在看得見你的角落,給你安全感
6楼2012-04-05 13:49:51
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