应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌表达，蛋白可溶但无酶活，如何解决
101/1返回列表
查看: 2394  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xinyaolu

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌表达，蛋白可溶但无酶活，如何解决 已有9人参与

本人在做一个植物蛋白，100kd，单链，含有两对二硫键，宿主大肠杆菌。蛋白可溶但无酶活。也使用了pET32a和Rosetta-gami 一直是可溶无酶活。请问，怎样处理才能得到活性的蛋白
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-21 10:50:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):是的 2010-10-21 12:26:45
帮不了楼主什么忙，我只知道大肠表达系统的缺点就是可能表达的外源蛋白是没有活性的，因为大肠杆菌不会对目标蛋白进行正确修饰。而芽孢杆菌表达系统就克服了这个缺点，但是芽孢杆菌不好转化。
赞一下(2人) 回复此楼
独YY不如众YY！！！
2楼2010-10-21 11:20:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

烟大考研

金虫 (正式写手)
建议做包涵体
回复此楼
心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
3楼2010-10-21 11:37:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
变性后复性
回复此楼
4楼2010-10-21 11:42:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
原核表达有无酶活要靠运气，要不为啥还要做突变筛选呢
赞一下 回复此楼
5楼2010-10-21 11:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leezz

铜虫 (小有名气)

愤青
现在国外都用枯草了。
赞一下 回复此楼
6楼2010-10-21 15:09:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wdyym

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
7楼2010-10-21 15:15:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rubisco580

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wdyym at 2010-10-21 15:15:13:
真核表达可能会好吧

有道理，原核表达的问题就是折叠不对或者修饰不足，例如糖基化。
试试真核宿主吧。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-10-21 16:38:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qingqingcao288

木虫 (小有名气)
同样建议用真核的
赞一下 回复此楼
9楼2010-10-21 17:25:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郭高杰

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by silicare at 2010-10-21 11:49:14
原核表达有无酶活要靠运气，要不为啥还要做突变筛选呢

突变筛选，怎么做
回复此楼
10楼2018-11-27 09:30:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xinyaolu 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 08工学调剂 +5 用户573181 2026-03-20 5/250 2026-03-20 15:47 by xia_2003
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭