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【求助/交流】大肠杆菌表达,蛋白可溶但无酶活,如何解决
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xinyaolu
木虫
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[交流]
【求助/交流】大肠杆菌表达,蛋白可溶但无酶活,如何解决
已有9人参与
本人在做一个植物蛋白,100kd,单链,含有两对二硫键,宿主大肠杆菌。蛋白可溶但无酶活。也使用了pET32a和Rosetta-gami 一直是可溶无酶活。请问,怎样处理才能得到活性的蛋白
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1楼
2010-10-21 10:50:07
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silicare
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新药研发
原核表达有无酶活要靠运气,要不为啥还要做突变筛选呢
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5楼
2010-10-21 11:49:14
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fjt198719
木虫
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专业: 微生物遗传育种学
★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):是的 2010-10-21 12:26:45
帮不了楼主什么忙,我只知道大肠表达系统的缺点就是可能表达的外源蛋白是没有活性的,因为大肠杆菌不会对目标蛋白进行正确修饰。而芽孢杆菌表达系统就克服了这个缺点,但是芽孢杆菌不好转化。
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独YY不如众YY!!!
2楼
2010-10-21 11:20:29
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leezz
铜虫
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注册: 2009-08-23
性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学
现在国外都用枯草了。
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6楼
2010-10-21 15:09:26
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wdyym
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7楼
2010-10-21 15:15:13
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