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xinyaolu

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】大肠杆菌表达，蛋白可溶但无酶活，如何解决已有9人参与

本人在做一个植物蛋白，100kd，单链，含有两对二硫键，宿主大肠杆菌。蛋白可溶但无酶活。也使用了pET32a和Rosetta-gami 一直是可溶无酶活。请问，怎样处理才能得到活性的蛋白

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1楼2010-10-21 10:50:07

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leezz

铜虫 (小有名气)

愤青

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现在国外都用枯草了。

6楼2010-10-21 15:09:26

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查看全部 10 个回答

fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):是的 2010-10-21 12:26:45

帮不了楼主什么忙，我只知道大肠表达系统的缺点就是可能表达的外源蛋白是没有活性的，因为大肠杆菌不会对目标蛋白进行正确修饰。而芽孢杆菌表达系统就克服了这个缺点，但是芽孢杆菌不好转化。

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独YY不如众YY！！！

2楼2010-10-21 11:20:29

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silicare

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原核表达有无酶活要靠运气，要不为啥还要做突变筛选呢

5楼2010-10-21 11:49:14

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wdyym

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7楼2010-10-21 15:15:13

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