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【求助/交流】大肠杆菌中的可溶性表达
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老实人sdu3375
木虫
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[交流]
【求助/交流】大肠杆菌中的可溶性表达
请教各位大侠,如何才能促进外源基因在大肠杆菌中的可溶性表达呢?原来表达的是包涵体形式,需要复性,活性也就降低了,现在希望促进其可溶性表达以取代包涵体。大家有神马好的建议吗?万分感谢!
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2011-01-13 23:46:23
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qinfujun
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最爱花诗雨(金币+1):鼓励参与~~ 2011-01-14 09:11:38
老实人sdu3375(金币+1): 2011-01-16 02:46:08
老实人sdu3375(金币+1): 2011-04-25 20:51:00
我以前的蛋白也是,我就采用低温(18度)过夜,低浓度IPTG(0.1mM),大量(每次诱导2L培养基),然后纯化,上清里总会有我要的蛋白,只是量稍微少点,但是足够我用了!
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2011-01-14 07:16:08
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最爱花诗雨(金币+1):欢迎交流 2011-01-14 09:13:10
老实人sdu3375(金币+1): 2011-01-16 02:46:12
低温低浓度诱导,或者与DsbA等融合伴侣融合表达,有助于可溶性表达。
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2011-01-14 07:51:52
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖
不是说可以换载体吗?有那种分泌型原核表达载体是吗?我也是老形成包涵体?可不可以换载体来解决呢?可是我不知道哪些是分泌型载体?我在网上一直没找到
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4楼
2011-05-10 09:36:13
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snoopyzxx
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主做什么基因啊?
低温表达或者用嗜冷表达系统
枯草芽孢表达系统
共表达系统
分泌表达
都可以尝试,
这些都是我今年要研究的东西哦。
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6楼
2013-01-21 22:37:58
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2013-01-21 21:25
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