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老实人sdu3375

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌中的可溶性表达

请教各位大侠，如何才能促进外源基因在大肠杆菌中的可溶性表达呢？原来表达的是包涵体形式，需要复性，活性也就降低了，现在希望促进其可溶性表达以取代包涵体。大家有神马好的建议吗？万分感谢！
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1楼 2011-01-13 23:46:23
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qinfujun

捐助贵宾 (著名写手)
★
最爱花诗雨(金币+1):鼓励参与~~ 2011-01-14 09:11:38
老实人sdu3375(金币+1): 2011-01-16 02:46:08
老实人sdu3375(金币+1): 2011-04-25 20:51:00
我以前的蛋白也是，我就采用低温(18度）过夜，低浓度IPTG(0.1mM),大量（每次诱导2L培养基），然后纯化，上清里总会有我要的蛋白，只是量稍微少点，但是足够我用了！
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2楼2011-01-14 07:16:08
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
最爱花诗雨(金币+1):欢迎交流 2011-01-14 09:13:10
老实人sdu3375(金币+1): 2011-01-16 02:46:12
低温低浓度诱导，或者与DsbA等融合伴侣融合表达，有助于可溶性表达。
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3楼2011-01-14 07:51:52
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晓想

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
不是说可以换载体吗？有那种分泌型原核表达载体是吗？我也是老形成包涵体？可不可以换载体来解决呢？可是我不知道哪些是分泌型载体？我在网上一直没找到
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4楼2011-05-10 09:36:13
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主做什么基因啊？
低温表达或者用嗜冷表达系统
枯草芽孢表达系统
共表达系统
分泌表达
都可以尝试，
这些都是我今年要研究的东西哦。
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6楼2013-01-21 22:37:58
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陈曦晨曦晨曦5楼
2013-01-21 21:25   回复  
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