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【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高?T7 RNA 聚合酶实测体验
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各位虫友,做体外转录、mRNA 合成的小伙伴,应该经常碰到这类难题:模板、NTP 都反复优化,RNA 产量始终上不去;转细胞实验时非特异性免疫背景很重,溯源发现是转录产生大量 dsRNA 副产物;部分酶批次差异大,小试效果尚可,放大制备就容易翻车;还有 RNase 污染造成 RNA 降解,辛苦制备的样品直接报废。 为解决课题组以及合作客户在体外转录中的痛点,我们公司开发了这款重组 T7 RNA 聚合酶(货号 DGN01),内部实验室以及合作课题组已经做过大量测试,在这里把实测情况分享出来,给有需求的虫友多一个试剂选型参考。 这款 T7 RNA 聚合酶来源于噬菌体 T7,对 T7 启动子具备高度专一识别能力,不会非特异性结合模板其他序列,转录过程可控。核心优势体现在两方面,一方面转录活性高,体系可支持毫克级 RNA 放大制备;另一方面能够有效控制 dsRNA 免疫副产物,减轻后续 RNA 纯化压力,对后续细胞功能实验十分友好。 酶蛋白纯度≥95%,严格控制核酸酶残留,保障转录后 RNA 的完整度。产品套装配套完整 10×T7 转录缓冲液以及 DTT 缓冲液,无需自行配制复杂组分,直接搭建 20 μL 标准反应体系,37℃孵育 1‑2 小时即可完成转录,新手也可以快速上手。 结合大量客户反馈,分享两个高频踩坑注意点: 1. 模板 DNA 建议在转录区域下游酶切为平端或者 5′突出末端,能够显著提升转录效率;3’突出末端会降低转录产出; 2. 缓冲液含有亚精胺,容易和核酸结合形成不溶物,反应体系现配现用,混匀后立即放入孵育,不要长时间冰上静置。 产品基础信息: 货号:DGN01 浓度:50 U/μL 保存:‑20℃,有效期 12 个月 包装规格:5000 Units、25000 Units,兼顾实验室小试摸索以及平台大批量 RNA 制备。 主要适用场景 1. mRNA 体外转录制备:科研级 mRNA 合成,低 dsRNA 副产物,降低细胞免疫干扰; 2. RNA 探针、反义 RNA 合成,用于原位杂交、RNase 保护实验; 3. RNAi 相关研究,减少副产物带来的实验干扰; 4. RNA 结构、体外生化功能的基础机制研究。 注意:本产品仅限科研使用,不可用于临床体内实验;避免反复冻融,建议‑20℃储存。 目前已有不少合作课题组把这款酶用于 mRNA 制备项目,对比多款进口、国产同类 T7 酶,在放大转录能力、控制双链副产物、批次稳定性上表现突出,帮助大家节省纯化成本与重复实验的时间。 大家如果在体外转录实验上遇到问题,可以在帖子下面留言交流技术问题;有需要了解产品细节、试用、报价的虫友,欢迎私信沟通。 |
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本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : T7RNA聚合酶中文产品说明书.docx
2026-08-18 15:59:08, 85.5 K
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