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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白酶在大肠杆菌表达在牛奶平板上有透明圈，液体诱导却无酶活
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楼1970-01-01 08:00:00
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zhjp326

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢分享经验~~ 2010-06-02 18:44:54
SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:43:21
有透明圈不一定有酶活啊，我的酶就是这样，后来测了反应1h的就有活性了，估计是大肠杆菌外泌蛋白不多，活性不够，所以难检测，可是试下多培养几天和上清酶液浓缩延长反应时间。
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4楼2010-06-02 10:12:45
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):欢迎回来交流~~ 2010-06-02 18:44:33
SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:43:43
可能的情况是有透明圈但不是由于蛋白酶水解而产生的，液体诱导没酶活有可能是酶活较低测不出来或者发酵条件不对
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2楼2010-06-02 00:14:04
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85715623

木虫 (正式写手)
SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:43:29
大肠杆菌表达一般都是包涵体，没有设么活性的，建议更换表达载体。
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3楼2010-06-02 07:23:11
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freshblack

金虫 (正式写手)
SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:42:49
同意楼上的~
试试改变发酵条件、取样时间，做个正交实验看看~
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勤有功，戏无益，满招损，谦得益
5楼2010-06-02 10:52:16
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