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fushxmy

金虫 (正式写手)

[交流] 大肠杆菌发酵问题已有19人参与

最近搞一个大肠杆菌的发酵项目,接种量是10%,初始OD是0.2,经过在发酵罐里30%的溶氧下培养至OD为8时加入0.2mM的IPTG进行诱导发酵,并且开始进行补料,经过24小时之后,OD达到20,之后的几天基本上保持在这个水平不变。下批发酵我准备提高初始OD至0.5,主要是通过摇瓶培养OD只能达到5左右,10%的接种量所以说OD只有0.5。不知道大家是如何提高OD量的,理论上E.coli在发酵罐里OD600可以达到100。下面是我的培养基配方:

种子培养基:1L

Glucose        10g;    KH2PO4    3g;      MgSO4.7H2O      0.5g;    Yeast extract        10g; NaCl         0.5g;    NH4Cl       1g

发酵培养基:1L
KH2PO4 2g;  K2HPO4 3g; (NH4)2SO4 5g; yeast extract 5g; antifoam 1ml;
Glucose 20g (恒定); MgSO4.7H2O 0.5g; VB 1mg; K12 trace metals 1ml;

用液氨调节pH=7.0
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秦皇汉武
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xiajungang

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
再过一两个月,我也要用发酵罐来做大肠杆菌诱导表达了,目前用的摇瓶,培养基为LB,希望与LZ多多交流。建议LZ往培养基加些微量元素混合液,如Fe, Mg。牛肉膏,玉米浆等均要加些。我们实验室培养的OD600最高可达到80。
吃苦耐劳,勇于创新,乐观热情,积极向上!
3楼2011-07-09 21:27:23
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94394220

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
理论上?那有具体的实例吗?
2楼2011-07-08 14:21:23
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dami200

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
是不是灭菌不完全啊,镜检怎么样啊,
积极向上
4楼2011-07-09 22:22:49
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fushxmy

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 94394220 at 2011-07-08 14:21:23:
理论上?那有具体的实例吗?

请问你们组里培养基是什么配方啊?谢谢
秦皇汉武
5楼2011-07-11 22:27:39
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