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大肠杆菌菌落形态请教
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各位好，本人首次做微生物培养实验，遇到问题，烦请大家解答~ 从其他实验室拿到纯大肠杆菌菌种（据说是纯E.Coli菌种）之后，我将其使用肉汤培养基培养后，用无菌水稀释，作为实验使用的大肠杆菌菌液。 之后为检测菌液中大肠杆菌浓度，于是使用营养琼脂培养基培养菌液水样（1mL菌液倒平板）。培养24h后长出如图片的所示菌落。 请各位忽略中间凸起的几块块琼脂，只看菌落。 菌落有些是长在在琼脂表面的，成圆块状，明显，如图左下方的菌落；而更有一部分是生长在在琼脂层内的，更小，呈小芝麻般的粒状，布满了整个琼脂层。。。 请问该两种群落是否代表了两种细菌？哪种才是大肠杆菌呢？还是两种都是？请有经验的虫友回应，谢谢了~  营养琼脂培养基培养产品 [ Last edited by stvmin on 2011-12-29 at 12:23 ] |
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【答案】应助回帖
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stvmin(金币+10): 嗯嗯，谢谢你呢~ 2011-12-30 20:51:37
zhang8826857(金币+5): good 2011-12-30 21:18:23
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zhang8826857(金币+5): good 2011-12-30 21:18:23
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仅从形态很难判断是否为同一株菌的，除非一些表型特征差异特别大，比如一个产色素，另一个菌落不产色素等。要想鉴别是否为同一菌，用大肠杆菌的特征引物去扩增检测就好了，比如你的大肠杆菌具有哪个抗性基因，用那个抗性基因的引物去验证，一般情况下不会有那么凑巧，正好污染菌也具有相同的抗性。如果要想准确鉴定是否为大肠杆菌，除了PCR扩增16S外，还需要一些基本的生理生化特性加以判别，16S基因序列不能100%保证区别到种，不过鉴定到属是没问题的。 PS:楼主的细菌计数方法很不科学，是否可以改进下呢？综合楼上几位所说，平板计数法只有在一个平板上的菌落数在30~300个才被广泛接受认为是准确的。如果大概的数量可以用OD值来判断，测定一下吸光值，然后就能估计对应的数量就出来了。仅供参考~~ |
11楼2011-12-30 15:50:17
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hong_31
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