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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 监测分析 » 【求助】大肠杆菌的测定
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857071522

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】大肠杆菌的测定

本人最近在用涂布分离法测定河水和井水的大肠杆菌，有几个问题想请教一下各位高手。
一、使用涂布环是否会使测出的大肠杆菌数偏小？（涂布完后会沾有少量菌液）
二、书上配制培养基的步骤是先过滤再加乳糖，为什么？可否反过来？
三、培养一两天后，培养基有时会产生大量水，请问是什么原因？
四、一个培养皿倒多少培养基合适，或者说培养基厚度多少合适？
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1楼 2011-01-22 19:53:30
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jennydersiry

金虫 (小有名气)
★
gaofeng925(金币+1): 积极 2011-01-24 12:34:31
857071522(金币+5): 谢谢，你的回答很详细！ 2011-01-24 15:31:39
一：涂布环所产生的菌数误差不会超过一个数量级，因为涂布法本来就不是十分准确的计数方法，同一个数量级内的菌数，例如1500和2000，我们认为是一样的，所以涂布环的误差可忽略不计
二：我们配制计数培养基时没有采用过滤，所以我个人认为没有影响
三：培养基蒸发产生水是正常现象，但如果量过大要注意，培养温度过高会使培养基中的水过度蒸发
四：15-20ml左右
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2楼2011-01-24 10:38:26
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857071522

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jennydersiry at 2011-01-24 10:38:26:
一：涂布环所产生的菌数误差不会超过一个数量级，因为涂布法本来就不是十分准确的计数方法，同一个数量级内的菌数，例如1500和2000，我们认为是一样的，所以涂布环的误差可忽略不计
二：我们配制计数培养基时没有 ...

我是在37摄氏度培养大肠杆菌，这个温度是否高？大肠杆菌分解培养基是否会产生水？
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4楼2011-01-24 15:37:47
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jennydersiry

金虫 (小有名气)
★
stormxuhao(金币+1): 积极 2011-01-25 12:20:38
857071522(金币+2): 谢谢！ 2011-01-25 16:26:56
这个温度是合适的，我们一般也用35度左右

我们并没有发现大肠杆菌的培养基会有大量产水的情况，希望你提供更多的信息，我们一起探讨：
1 你的平板是否在培养皿和培养基完全冷却后涂布的？若你在培养基和平板还温热的状态下进行涂布，培养基蒸发并冷凝会产生一定量的水
2 若你的水是在培养过程中产生的，是你每一个样品都产生，还是偶尔发现？我个人认为，大肠杆菌是兼性厌氧菌，在氧气浓度高的环境里进行有氧呼吸，代谢产物会产生水，氧气浓度低的环境里不会产水，当然这是我的猜测，你可以对培养皿进行密封包裹进行进一步验证

[ Last edited by jennydersiry on 2011-1-25 at 12:10 ]
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5楼2011-01-25 12:09:36
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857071522

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jennydersiry at 2011-01-25 12:09:36:
这个温度是合适的，我们一般也用35度左右

我们并没有发现大肠杆菌的培养基会有大量产水的情况，希望你提供更多的信息，我们一起探讨：
1 你的平板是否在培养皿和培养基完全冷却后涂布的？若你在培养基和平板还 ...

涂布时是等培养皿和培养基完全冷却的，但我发现，在趁热倒培养基到培养基完全冷却这段时间，培养皿盖上会凝结一些水。这应该是水来源的一部分。至于你说的大肠杆菌是兼性厌氧菌，理论上应该是成立的，不过我没试过。  在顺便问一下，你们计数时是如何数的？结果如何表示？
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6楼2011-01-25 16:01:24
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jennydersiry

金虫 (小有名气)
★
stormxuhao(金币+1): 积极 2011-01-27 07:27:18
857071522(金币+2): 谢谢你的耐心解答 2011-01-27 20:44:06
引用回帖:
Originally posted by 857071522 at 2011-01-25 16:01:24:

涂布时是等培养皿和培养基完全冷却的，但我发现，在趁热倒培养基到培养基完全冷却这段时间，培养皿盖上会凝结一些水。这应该是水来源的一部分。至于你说的大肠杆菌是兼性厌氧菌，理论上应该是成立的，不过我没试 ...

我们将其稀释成不同的梯度，涂布培养后选取菌落数在30-100的梯度进行计数，计数就是把明显的菌落用黑笔在背面点个点，查点就行，计数结果乘以稀释倍数，单位用cfu/ml表示，因误差较大，可做多个平行样

另外，若水只是凝结在培养皿盖上，没有大量流出，就是培养过程中培养基蒸发出的水，可不必考虑影响

[ Last edited by jennydersiry on 2011-1-26 at 19:26 ]
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7楼2011-01-26 19:21:17
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Linwenshi

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
TonyGeN: 金币+1, 交流积极 欢迎常来 2012-08-15 21:51:43
倒培养皿大概25ml，厚度4mm就可以。。培养的温度是35±1°C
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8楼2012-08-15 19:33:50
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wangyanlinx

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
609953楼: Originally posted by jennydersiry at 2011-01-26 19:21:17
我们将其稀释成不同的梯度，涂布培养后选取菌落数在30-100的梯度进行计数，计数就是把明显的菌落用黑笔在背面点个点，查点就行，计数结果乘以稀释倍数，单位用cfu/ml表示，因误差较大，可做多个平行样

另外， ...

请问如果一个平板的菌落数是100 那乘以稀释倍数假设10000 那么这个最终浓度是谁的浓度？ 就是这个稀释度的浓度吗？还是说没有稀释时的浓度  也就是你取得菌的最大浓度？可能没表达明白  希望你先帮我解决一下 急啊 不懂
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9楼2012-11-08 14:55:29
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helo

铜虫 (小有名气)
学习一下
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10楼2012-11-08 18:58:39
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jennydersiry

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1624011楼: Originally posted by wangyanlinx at 2012-11-08 14:55:29
请问如果一个平板的菌落数是100 那乘以稀释倍数假设10000 那么这个最终浓度是谁的浓度？ 就是这个稀释度的浓度吗？还是说没有稀释时的浓度  也就是你取得菌的最大浓度？可能没表达明白  希望你先帮我解决一下 急啊 ...

如果一个平板的菌落数是100 ，那么这是0.1ml稀释液里的菌落数（假设你涂布时用的是0.1ml菌液），稀释倍数假设10000，那么未稀释液里的菌落数应是100*10*10000个每毫升，不知你能明白否
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11楼2012-11-09 10:24:22
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zyxme3楼
2011-01-24 11:19   回复  
gaofeng925: 不要纯表 2011-01-24 12:34:42
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