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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 大肠杆菌菌落形态请教
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MagicWoods

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
stvmin(金币+10): 嗯嗯，谢谢你呢~ 2011-12-30 20:51:37
zhang8826857(金币+5): good 2011-12-30 21:18:23
仅从形态很难判断是否为同一株菌的，除非一些表型特征差异特别大，比如一个产色素，另一个菌落不产色素等。要想鉴别是否为同一菌，用大肠杆菌的特征引物去扩增检测就好了，比如你的大肠杆菌具有哪个抗性基因，用那个抗性基因的引物去验证，一般情况下不会有那么凑巧，正好污染菌也具有相同的抗性。如果要想准确鉴定是否为大肠杆菌，除了PCR扩增16S外，还需要一些基本的生理生化特性加以判别，16S基因序列不能100%保证区别到种，不过鉴定到属是没问题的。
PS:楼主的细菌计数方法很不科学，是否可以改进下呢？综合楼上几位所说，平板计数法只有在一个平板上的菌落数在30~300个才被广泛接受认为是准确的。如果大概的数量可以用OD值来判断，测定一下吸光值，然后就能估计对应的数量就出来了。仅供参考~~
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11楼2011-12-30 15:50:17
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stvmin

银虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by zhaohp85 at 2011-12-29 15:32:19:
1.你倒板时琼脂已经凝固了或者是倒完板后琼脂未充分凝固你就倒扣培养了
2.应该设空白对照。
3.看菌落形态像大肠杆菌。具体确认需要染色镜检和生化鉴定

好的~非常非常谢谢你哈~
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12楼2011-12-30 20:54:01
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stvmin

银虫 (初入文坛)
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楼: Originally posted by wjf008 at 2011-12-29 14:42:36:
大肠杆菌的菌落比较湿润，看着像，你可以做一下革兰氏染色，阴性的话基于菌种的来源基本确定是大肠。如果想确定只能做生化试验了。

非常谢谢~
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13楼2011-12-30 20:54:54
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stvmin

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
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楼: Originally posted by wzwhq at 2011-12-29 14:41:58:
不确定是不是大肠的话就做个革兰氏染色和生化试验，不过看样子应该是大肠，以后做的话多稀释一下，菌数范围在30-300内有效

谢谢虫友的回帖啊~~
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14楼2011-12-30 20:55:26
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stvmin

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
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楼: Originally posted by hong_31 at 2011-12-29 16:41:20:
倾注培养的话你说的现象是正常的，但是稀释倍数不够，平板计数菌落数最好30-300之间。

谢谢你！~
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15楼2011-12-30 20:55:42
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stvmin

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by 木叶凌波 at 2011-12-29 17:14:12:
现在鉴定是不是大肠，不就测个16s的事吗
菌落PCR一下送测序，30块钱搞定，保证准确，生化鉴定麻烦又费时

OK，谢谢~受教了~·
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16楼2011-12-30 20:56:11
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)
我没做过倾注的，我理解倾注的，应该是倒在培养基表面。
我做过涂布的，在涂布的基础上，我怀疑你的培养基，我以前遇到过做的培养基很烂，或者琼脂不好。在凝固的时候 由于没有融化。稍膨大的琼脂颗粒在培养基中间会凝结，形成培养基中间颗粒的现象。如果涂布在培养及表面绝对不会长到培养基中间去
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17楼2011-12-30 22:39:32
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣
确实做的有点问题，好好再做一下吧！菌落像大肠杆菌！
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dasheng1980
18楼2011-12-31 13:54:51
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diy患者

铁虫 (正式写手)
平铺的，不凸起的，边缘不亮的应该是大肠杆菌。
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19楼2012-01-09 00:09:12
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94394220

金虫 (正式写手)
都是大肠，在表面生长的话，因为没有受到空间的限制，所以呈圆形，光滑。如果是在琼脂内部生长的话，就会呈现一定角度的菱形、或者不规则的多角形。这个不是两种不同的形态，而是由于不同的生长空间限制所造成的不同表观。
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20楼2012-01-10 09:24:49
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