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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌在营养琼脂上培养生长的平板计数问题
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gaogaominghui

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌在营养琼脂上培养生长的平板计数问题 已有14人参与

大家好~ 求助~~
最近在实验中，碰到了很奇怪的问题，不知道怎么回事，无法解释。

1。大肠杆菌在营养琼脂上，30°C，生长24h，一个colony都没有长出来！
2。大肠杆菌稀释的倍数，1:1 有200,300,400,500个不等，可是1:10 的，却一个都没有！
3。 稀释的倍数，有时候1:10的一个都没有，但是1:100的却有很多！

这到底是怎么回事啊？我觉得在操作过程中，稀释倍数什么的，都没有错误啊，在涂布的时候，也很注意，可是怎么就出现这种情况呢？

虫子们有没有遇到过这样的问题啊？请帮助~~ 非常谢谢了~
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一日三省，不断进步 健康、快乐、充实每一天！ (*^__^*) 嘻嘻……
1楼 2010-06-09 11:47:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+3):解释的不错~~ 2010-06-09 15:57:18
虽说细菌生长的适宜温度是30-35度，但是你不要用30度啊，你用高点的温度如34度试试。还有就是可以用检测控制菌的温度培养36-37度。

低倍数下不生长，这个问题你可以考虑用低倍数稀释，因为你的初始菌浓度太低了，你用5倍稀释看看，能不能有较好的稀释生长曲线。

1:10的一个都没有，但是1:100的却有很多，这种情况的话你可以考虑菌液里是否有抑菌的物质。你应该从菌的获得、稀释液、实验方法等方面来考虑，是什么抑菌。解释是低倍数下抑菌物质含量高抑制菌生长，稀释后抑菌物质含量降低，不再抑制菌生长。
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今夜的寂寞，让我如此美丽。
7楼2010-06-09 13:26:16
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):maybe 2010-06-09 16:09:59
楼上说的都很好了，总不至于1:10的先做，涂布棒太热，都把菌烫死了吧。
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
9楼2010-06-09 15:25:42
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普通回帖

gaogaominghui

银虫 (小有名气)
自己顶一下，虫子们帮帮忙~~
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一日三省，不断进步 健康、快乐、充实每一天！ (*^__^*) 嘻嘻……
2楼2010-06-09 12:10:23
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1):good！ 2010-06-09 12:31:16
如果试验条件都一致的话，可能是稀释过程中的操作问题引起的，如取液不均一，稀释过程没有摇匀，多做几个重复，取可信度比较高的板计数，要保证实验具有可重复性，计数在某个数量级范围内有误差还是可以理解的。祝实验顺利成功！
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3楼2010-06-09 12:17:59
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priorpost06

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-06-09 15:58:00
一，大肠杆菌的最适合生长温度是37 ℃。培养问题应该不是太大。
二，稀释的时候一定要混匀，取样要均匀。建议使用漩涡振荡器。操作不要太快，尽量混匀，再做下一步。
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4楼2010-06-09 12:48:28
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zhiyuanjyf

木虫 (正式写手)
★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):有道理~~ 2010-06-09 15:56:12
稀释时漩涡震荡一下。。。
一定要混匀。。。
重复几次。。。
做个1：5的。。
和1：50的。。。
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5楼2010-06-09 12:51:18
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j2

木虫 (正式写手)
★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
为什么用30℃捏？不是37℃么
稀释时混匀取菌液应该没问题的啊
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
6楼2010-06-09 13:05:26
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知秋

至尊木虫 (著名写手)
多几个重复试下哈
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8楼2010-06-09 14:02:03
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gaogaominghui

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by srlee at 2010-06-09 12:17:59:
如果试验条件都一致的话，可能是稀释过程中的操作问题引起的，如取液不均一，稀释过程没有摇匀，多做几个重复，取可信度比较高的板计数，要保证实验具有可重复性，计数在某个数量级范围内有误差还是可以理解的。祝 ...

非常谢谢~~ ^_^
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一日三省，不断进步 健康、快乐、充实每一天！ (*^__^*) 嘻嘻……
10楼2010-06-09 15:30:03
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