24小时热门版块排行榜    

查看: 5300  |  回复: 8

xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】在线等:E.coli BL21 转化子在kan平板上要长多久

质粒用的是pET29a,宿主菌是E.coli BL21 (DE3),抗生素是kan(卡那霉素)
请问转化后涂平板一般要长多长时间啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)


xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-09 10:10:43
转化之后与原始菌株生长速度之间没有什么区别(抗生素不过量的话),正常情况转化后在12h之内是可以看到转化子菌落了。
2楼2011-04-09 10:08:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by ls2046 at 2011-04-09 10:08:19:
转化之后与原始菌株生长速度之间没有什么区别(抗生素不过量的话),正常情况转化后在12h之内是可以看到转化子菌落了。

谢谢!但是我看见pET表达手册上说,kan平板不长卫星菌落,37℃要倒置培养15-18小时的啊
3楼2011-04-09 10:11:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
xiaoyu1014126(金币+2): 2011-04-09 10:23:05
不一定的
这个还得看你的蛋白对菌体有莫有毒性
要是 没有毒性的话,也即是不会干扰菌体自然生长的话
一般过夜就会生长出菌落来

但是要是蛋白有毒性的话
可能短的要近20小时
长的得好几天
我们师姐做的一个蛋白在37度24小时后4度近天菌落才长出来
4楼2011-04-09 10:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-09 10:44:17
一般的12-24h,如果不长可以放置时间长点,kan比Amp稳定,不容易失活,不容易长出卫星菌落的。
5楼2011-04-09 10:30:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郝钊

金虫 (小有名气)


xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-09 12:52:43
我之前做转化,转化子一般在八个小时就可以看到,不过很小,12-14小时就长得差不多了,可以挑了。
6楼2011-04-09 11:33:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)


来学习的
7楼2011-04-09 11:59:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhyzx

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
过夜基本上就差不多了,时间太长没长的话就有问题了
8楼2011-04-09 15:11:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
一般过夜就可以长出来了,你的目的是看质粒是否已经转化进入目的菌中了。
等菌长出来验证一下就可以了!
9楼2011-04-09 17:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoyu1014126 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 C79jjtjAKjEn 2026-09-15 3/150 2026-09-18 03:30 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +7 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 22:53 by cuPZTDXS3VOd
[有机交流] 各位大神,目前国内有哪些比较好用的逆合成软件? 20+3 zapen 2026-09-15 7/350 2026-09-17 16:40 by 北京莱茵编辑
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 yaCh4X3wd045 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-17 03:52 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:16 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-16 22:26 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
请填处理意见