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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] 转化问题 已有10人参与

最近转化总是不顺利,要么出现假阳性,提质粒没有任何东西;要么直接没有菌落长出;要么就是卫星菌落。。。各种连接比例都试过了,叫我怎么办呀?还望高手指导一下下啊。。。。。
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花花贝

金虫 (知名作家)

只能多做几次了
2楼2011-12-08 22:37:30
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
不一定是连接的问题,也可能是感受态细胞的问题。
3楼2011-12-09 07:54:19
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rendy79

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
做好各方面情况的对照就知道问题出在哪里了?
4楼2011-12-09 08:57:43
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
还有,你的抗生素是不是变质了,检查下
生活是美好的
5楼2011-12-09 10:23:38
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sxq大嘴

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
鉴定一下质粒有木有问题,酶切一下。涂板的时候,也做个对照看看涨不涨
6楼2011-12-09 10:31:50
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panda73

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
听起来,你是在做克隆。
做克隆时,有些克隆是必须的:双酶切时设置单酶切对照,连接时设置空载体连接的对照,转化时设置空载体连接的转化对照,以及阳性质粒的转化的对照(如果你怀疑感受态的效率太低),只有全面的对照才能分析问题出在哪个环节,否则,楼上的各种可能都会出现,你还是得通过设置各种对照一一验证
7楼2011-12-09 10:56:19
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jjxcz

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
你要排除以下问题:片段没问题,载体没问题,酶切没问题,抗生素没问题,感受态没问题,然后再做对照。
祝你顺利。
8楼2011-12-09 16:31:12
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vnini

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
我也是各种问题,lz慢慢来,一起加油!~
9楼2011-12-09 17:12:56
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-09 07:54:19:
不一定是连接的问题,也可能是感受态细胞的问题。

感受态应该是没问题的,都没有用我们自己做的,都已经买天根的了
10楼2011-12-09 18:48:58
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