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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] 转化问题 已有10人参与

最近转化总是不顺利，要么出现假阳性，提质粒没有任何东西；要么直接没有菌落长出；要么就是卫星菌落。。。各种连接比例都试过了，叫我怎么办呀？还望高手指导一下下啊。。。。。
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vnini

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1楼 2011-12-08 21:34:23
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花花贝

金虫 (知名作家)
只能多做几次了
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2楼2011-12-08 22:37:30
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
不一定是连接的问题，也可能是感受态细胞的问题。
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3楼2011-12-09 07:54:19
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rendy79

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
做好各方面情况的对照就知道问题出在哪里了？
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4楼2011-12-09 08:57:43
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
还有，你的抗生素是不是变质了，检查下
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生活是美好的
5楼2011-12-09 10:23:38
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sxq大嘴

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
鉴定一下质粒有木有问题，酶切一下。涂板的时候，也做个对照看看涨不涨
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6楼2011-12-09 10:31:50
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panda73

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
听起来，你是在做克隆。
做克隆时，有些克隆是必须的：双酶切时设置单酶切对照，连接时设置空载体连接的对照，转化时设置空载体连接的转化对照，以及阳性质粒的转化的对照（如果你怀疑感受态的效率太低），只有全面的对照才能分析问题出在哪个环节，否则，楼上的各种可能都会出现，你还是得通过设置各种对照一一验证
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7楼2011-12-09 10:56:19
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jjxcz

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你要排除以下问题：片段没问题，载体没问题，酶切没问题，抗生素没问题，感受态没问题，然后再做对照。
祝你顺利。
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8楼2011-12-09 16:31:12
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vnini

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
我也是各种问题，lz慢慢来，一起加油！~
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9楼2011-12-09 17:12:56
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-09 07:54:19:
不一定是连接的问题，也可能是感受态细胞的问题。

感受态应该是没问题的，都没有用我们自己做的，都已经买天根的了
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10楼2011-12-09 18:48:58
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