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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 转化问题
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by nuoyaeva at 2011-12-09 10:23:38:
还有，你的抗生素是不是变质了，检查下

？这个问题要怎么检查？抗生素变性可能导致的是那种结果？嘿嘿，麻烦麻烦啦
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11楼2011-12-09 18:50:39
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resurgam

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
假阳性可能是抗生素有问题或者感受态被带抗性细菌污染了。如果确定感受态没问题，可以把没做转化的感受态也涂一点在板上，理论上来说不应该长任何东西出来的。如果长了那么恭喜你，你的抗生素有问题了，所有的板都需要重新倒。
提质粒没有任何东西只能说是假阳性了，如果克隆挑的比较多，可以先做个菌液电泳或者菌液PCR什么的，虽然也有假阳性，但好歹筛了一遍不用每个但克隆都提个质粒。把菌液电泳或者菌液PCR结果显阳性的菌液提质粒，提出的质粒在酶切鉴定一下，如果片段大小差不多，则可以送出去测序确定了。
没有菌落长出或者是你连接没连接好，或者是你转化的效率低，或者是你搞错了抗生素。把氨苄抗性的涂到kana板上是不会长的。
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piaoyunokok
12楼2011-12-09 19:29:53
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
13楼2011-12-10 22:32:06
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by resurgam at 2011-12-09 19:29:53:
假阳性可能是抗生素有问题或者感受态被带抗性细菌污染了。如果确定感受态没问题，可以把没做转化的感受态也涂一点在板上，理论上来说不应该长任何东西出来的。如果长了那么恭喜你，你的抗生素有问题了，所有的板都 ...

谢谢，好详细的啊
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14楼2011-12-10 23:23:56
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