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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】质粒提取线性化的很多

今天提取质粒，是将我的目的片段连接到pMD19上转化后，提取的，发现线性化的质粒浓度差不多和超螺旋的一样浓了，后面我要将我的目的片段双酶切从质粒上切下来，请问这样的质粒提取结果对双酶切有影响吗？效果好吗？

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1楼 2011-03-23 13:39:31

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susizheng

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-24 12:52:09
dhd997(金币+3): good 2011-03-24 13:37:50

你的质粒怎么这么多条带，震荡太剧烈，基因组污染了吧。
PS：貌似提质粒不会提到线性化的质粒的，以前有帖子已经说明过了。

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2楼2011-03-23 16:53:28

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smiled001

禁虫 (小有名气)

★
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-24 12:52:12
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-03-24 13:38:01

本帖内容被屏蔽

3楼2011-03-24 11:10:50

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zj408694018

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你得重新提质粒，你那个没法酶切的

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4楼2011-03-24 18:28:20

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virus2009

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我觉得没问题，只要能用marker表明自己想要的条带，问题不大！！！

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5楼2011-03-25 09:30:15

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zhangxn2010

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双酶切应该没问题，毕竟还是要回收纯化的

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6楼2011-03-25 09:50:12

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toxicpeach

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感觉有不止一种质粒，大小差别还挺大的

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7楼2011-03-25 10:29:41

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另一个天堂

金虫 (小有名气)

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线性化DNA含量多，很可能是DNA变性时，动作过大或变性时间过长了吧。我以前也遇见这种情况，不过现在很好了，基本上两条带，而且主要是超螺旋DNA

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8楼2011-03-27 19:02:39

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意孤城_

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

这明显不是纯的质粒啊，不可能这么多条带

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9楼2013-05-03 16:26:40

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