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【求助/交流】线性化质粒转化枯草方法
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请问各位高手: BglII线性化质粒, 采用spizizen法和GM法转枯草, 涂LB/红霉素(5或7或10ug/ml)平板筛选,结果:红霉素浓度低的平板大概长30个左右,浓度高的平板长的菌就少,大概10个左右。 鉴定:采用LB/淀粉平板筛选,原理是重组片段插入染色体导致淀粉酶失活。 困惑:至今一个阳性克隆都筛不到。 求助:1.请问还有别的转化方法吗?比如Molecular method for Bacillus specise中的方法。 2.线性化位点可以随便选择吗?BamHI可以用吗? 我应该如何改进啊? 兄弟姐妹们不要吝啬你的知识啊,帮帮小弟吧 ![]() [ Last edited by wh7690703 on 2011-4-20 at 15:12 ] |
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