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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切之后跑回收胶总是没有条带是怎么回事呢
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wang1127yan

银虫 (初入文坛)

[求助] 酶切之后跑回收胶总是没有条带是怎么回事呢

酶切之后跑回收胶总是没有条带是怎么回事呢，同时回收两个，一个有，一个就没有
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1楼 2012-09-04 17:46:26
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wang1127yan: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-09-19 12:32:50
首先，注意你在加酶切体系的时候是不是出现了污染，其次，酶切所用的质粒或片段浓度是否够
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有时候，一句话，可以改变未来
2楼2012-09-04 18:16:38
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议加大酶切体系中质粒的量，酶切时间可以适当延长点！
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持之以恒、永不放弃！
3楼2012-09-04 18:22:03
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lecou

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也经常会出现这种问题，熔胶的时候超微久一点，然就就是家buffer的时候可以适当的放置一会
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希望自己能平常心面对实验中的种种
4楼2012-09-05 08:03:25
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lecou

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也经常会出现这种问题，熔胶的时候超微久一点，然就就是家buffer的时候可以适当的放置一会
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希望自己能平常心面对实验中的种种
5楼2012-09-05 14:01:21
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你染色剂用的是什么，EB的话一般不会有这种问题，其他染色剂就不说，可以把你提取的质粒也点样看看，做个对照。
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6楼2012-09-05 15:19:56
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-06 13:44:22
两个同时回收，一个有一个没有，说明你的操作和试剂盒应该是没问题的，问题可能出现在你前面的酶切上或者DNA本身上，先用DNA跑个电泳看看是否有问题，没有问题在考虑修改酶切体系和条件。
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生物化学与分子生物学
7楼2012-09-05 16:02:35
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wang1127yan

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-09-04 18:22:03
建议加大酶切体系中质粒的量，酶切时间可以适当延长点！

好的，谢谢
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8楼2012-09-05 16:59:19
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wang1127yan

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lidonghong at 2012-09-05 16:02:35
两个同时回收，一个有一个没有，说明你的操作和试剂盒应该是没问题的，问题可能出现在你前面的酶切上或者DNA本身上，先用DNA跑个电泳看看是否有问题，没有问题在考虑修改酶切体系和条件。

我基本都是DNA跑完点用没有问题才接着酶切的，可就是不能同时有条带，总是一个有一个没有
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9楼2012-09-05 17:00:33
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by wang1127yan at 2012-09-05 17:00:33
我基本都是DNA跑完点用没有问题才接着酶切的，可就是不能同时有条带，总是一个有一个没有...

酶切回收之后你跑过胶没？
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生物化学与分子生物学
10楼2012-09-06 08:07:18
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