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geyihui

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[求助] PCR产物跑胶已有8人参与

请问我PCR（ps）产物比模板还要大，我模板是4.3Kb，我全部P，可是出来的条带在marker的5K那边，怎么回事，回事marker的问题吗

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1楼 2015-06-03 09:59:05

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geyihui

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引用回帖:

5楼: Originally posted by zd1213 at 2015-06-03 16:47:17
如果只能以质粒为模板进行扩增，那就尝试：1、用不同的试剂盒重新提取质粒，2、重新设计引物，3、优化PCR条件，4、找到包含你目的片段的长片段进行酶切，前提条件是质粒上有这样的酶切位点，又不至于把你的目的片段 ...

我是在这个质粒为模板的条件下进行定点饱和突变（3个碱基NNN），所以用的这个质粒，好郁闷，引物已经重新设计了，先前是压根就p不出来