应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！
501/5返回列表12345下一页
查看: 3708  |  回复: 49
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yln819

新虫 (正式写手)

[求助] 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！ 已有9人参与

我质粒、PCR产物双酶切后回收不回来，切胶的时候质粒是用了五个泳道的胶，pcr用了三个泳道的，可回收后还是没有条带！求指导！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-27 10:12:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wolovexiehe

铁虫 (初入文坛)
是不是片段太多，回收柱子不合适
赞一下(1人) 回复此楼
即使失去一切，也不失去微笑
3楼2014-06-27 10:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主
引用回帖:
9楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 11:49:46
宽带试过一次，加的没你这么多，没纯化出来，我再试一下宽带

试剂盒刚买的应该没问题的...

一般割胶回收，效果差，大多数是两个，一个本身浓度不够，另一个是试剂盒问题
我有一次上样100ul一个孔哈哈
赞一下(1人) 回复此楼
天行健
13楼2014-06-27 15:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yln819: 金币+2, ★有帮助 2014-06-27 10:59:01
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-27 12:06:36
你质粒，PCR产物大约切了多少的量？
质粒多大？  载体骨架多大？   PCR产物多大？
下次把跑胶后的那个要切的胶图挂上来看看。
祝早成功。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-27 10:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-27 10:49:45
你质粒，PCR产物大约切了多少的量？
质粒多大？  载体骨架多大？   PCR产物多大？
下次把跑胶后的那个要切的胶图挂上来看看。
祝早成功。

质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-27 10:58:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolovexiehe at 2014-06-27 10:52:47
是不是片段太多，回收柱子不合适

我也试过就两个泳道一块回收，以及一个，PCR 产物纯化的时候可以，酶切就回收不回来,酶切后的带有的不是很亮，这个有关系吗？
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-27 11:03:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 10:58:46
质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp...

质粒加了1ul，PCR产物3ul。
那质粒有多少ug?   pcr产物多少ug？
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-27 11:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 10:58:46
质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp...

你质粒切完后要回收的那段是多少bp？
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-27 11:07:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yln819: 金币+3, ★有帮助 2014-06-27 11:40:12
yln819: 金币+2 2014-06-27 16:08:01
一般情况下，我跑宽胶，一个孔上样至少40ul以上，而且亮度要求很高，否则回收效果很一般

当然，你看下试剂盒过期了没
赞一下 回复此楼
天行健
8楼2014-06-27 11:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-27 11:09:30
一般情况下，我跑宽胶，一个孔上样至少40ul以上，而且亮度要求很高，否则回收效果很一般

当然，你看下试剂盒过期了没

宽带试过一次，加的没你这么多，没纯化出来，我再试一下宽带

试剂盒刚买的应该没问题的
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-27 11:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-27 11:07:50
你质粒切完后要回收的那段是多少bp？...

接近3000bp,多少ug没有计算，这个必须算着加吗？
赞一下 回复此楼
10楼2014-06-27 11:51:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yln819 的主题更新
501/5返回列表12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:19 by Demonsssss
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 309求调剂 +4 花与叶@ 2026-03-10 4/200 2026-03-14 21:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:06 by tranquil_ya
[考研] 288求调剂 +14 王晓阳- 2026-03-09 19/950 2026-03-14 02:05 by JourneyLucky
[考研] 085600求调剂 +3 a邵星池 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:32 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭