应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！
501/5返回列表12345下一页
查看: 3710  |  回复: 49
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yln819

新虫 (正式写手)

[求助] 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！ 已有9人参与

我质粒、PCR产物双酶切后回收不回来，切胶的时候质粒是用了五个泳道的胶，pcr用了三个泳道的，可回收后还是没有条带！求指导！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-27 10:12:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wolovexiehe

铁虫 (初入文坛)
是不是片段太多，回收柱子不合适
赞一下(1人) 回复此楼
即使失去一切，也不失去微笑
3楼2014-06-27 10:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主
引用回帖:
9楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 11:49:46
宽带试过一次，加的没你这么多，没纯化出来，我再试一下宽带

试剂盒刚买的应该没问题的...

一般割胶回收，效果差，大多数是两个，一个本身浓度不够，另一个是试剂盒问题
我有一次上样100ul一个孔哈哈
赞一下(1人) 回复此楼
天行健
13楼2014-06-27 15:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yln819: 金币+2, ★有帮助 2014-06-27 10:59:01
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-27 12:06:36
你质粒，PCR产物大约切了多少的量？
质粒多大？  载体骨架多大？   PCR产物多大？
下次把跑胶后的那个要切的胶图挂上来看看。
祝早成功。
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-27 10:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-27 10:49:45
你质粒，PCR产物大约切了多少的量？
质粒多大？  载体骨架多大？   PCR产物多大？
下次把跑胶后的那个要切的胶图挂上来看看。
祝早成功。

质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-27 10:58:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wolovexiehe at 2014-06-27 10:52:47
是不是片段太多，回收柱子不合适

我也试过就两个泳道一块回收，以及一个，PCR 产物纯化的时候可以，酶切就回收不回来,酶切后的带有的不是很亮，这个有关系吗？
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-27 11:03:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 10:58:46
质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp...

质粒加了1ul，PCR产物3ul。
那质粒有多少ug?   pcr产物多少ug？
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-27 11:07:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 10:58:46
质粒加了1ul，PCR产物3ul，酶1ul；质粒3000bp，PCR1000多bp...

你质粒切完后要回收的那段是多少bp？
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-27 11:07:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yln819: 金币+3, ★有帮助 2014-06-27 11:40:12
yln819: 金币+2 2014-06-27 16:08:01
一般情况下，我跑宽胶，一个孔上样至少40ul以上，而且亮度要求很高，否则回收效果很一般

当然，你看下试剂盒过期了没
赞一下 回复此楼
天行健
8楼2014-06-27 11:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-27 11:09:30
一般情况下，我跑宽胶，一个孔上样至少40ul以上，而且亮度要求很高，否则回收效果很一般

当然，你看下试剂盒过期了没

宽带试过一次，加的没你这么多，没纯化出来，我再试一下宽带

试剂盒刚买的应该没问题的
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-27 11:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-06-27 11:07:50
你质粒切完后要回收的那段是多少bp？...

接近3000bp,多少ug没有计算，这个必须算着加吗？
赞一下 回复此楼
10楼2014-06-27 11:51:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yln819 的主题更新
501/5返回列表12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +9 大米饭！ 2026-03-15 12/600 2026-03-16 21:59 by 大米饭！
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 309求调剂 +5 花与叶@ 2026-03-10 5/250 2026-03-16 14:13 by 哦哦123
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂，科研和技能十分丰富，求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 收调剂 +7 调剂的考研学生 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:57 by 麦茶汤圆
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭