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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！
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335341312

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
yln819: 金币+1, ★有帮助 2014-07-03 19:03:58
可能是柱子的问题，也可能是你做回收时切的量太少了，胶回收是有损失的，回收后即使没有条带，也可能是回收后浓度太低 看不到
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41楼2014-07-03 16:43:10
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yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
41楼: Originally posted by 335341312 at 2014-07-03 16:43:10
可能是柱子的问题，也可能是你做回收时切的量太少了，胶回收是有损失的，回收后即使没有条带，也可能是回收后浓度太低 看不到

恩，有可能
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42楼2014-07-03 19:04:00
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
yln819: 金币+1 2014-07-04 00:04:59
本帖仅楼主可见
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43楼2014-07-03 19:53:23
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yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
43楼: Originally posted by louis_cheung at 2014-07-03 19:53:23
不知lz用的是神马试剂盒，很多胶回收试剂盒中有一buffer使用前需加乙醇，不然dna在使用此buffer时会被洗脱掉，最后再用水或te洗脱时就没有dna了⊙﹏⊙

用的全式金的试剂盒，乙醇确定已经加了，我回收PCR产物的时候是成功的，这个可以肯定是没有问题的。
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44楼2014-07-04 00:05:03
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-27 15:00:19
一般割胶回收，效果差，大多数是两个，一个本身浓度不够，另一个是试剂盒问题
我有一次上样100ul一个孔哈哈...

天根的试剂盒的保质期是一年吗？我们的整一年了，谢谢版主
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踏实
45楼2014-08-29 15:29:57
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主
引用回帖:
45楼: Originally posted by hajierlove at 2014-08-29 15:29:57
天根的试剂盒的保质期是一年吗？我们的整一年了，谢谢版主...

这个还真没关注过保质期。
打电话问下吧
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天行健
46楼2014-08-29 17:29:47
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yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
45楼: Originally posted by hajierlove at 2014-08-29 15:29:57
天根的试剂盒的保质期是一年吗？我们的整一年了，谢谢版主...

不知道呢，没注意过
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47楼2014-08-29 20:28:14
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wyh818

银虫 (初入文坛)
楼主，酶切产物电泳检测不到条带，你下面又做连接了没有？这个做法行不行？
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48楼2015-01-22 13:39:35
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yln819

新虫 (正式写手)
引用回帖:
48楼: Originally posted by wyh818 at 2015-01-22 13:39:35
楼主，酶切产物电泳检测不到条带，你下面又做连接了没有？这个做法行不行？

我酶切产物可以检测到条带，但是连接后酶切检测不到条带，后来加大量进行回收的，操作仔细是没有问题的
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49楼2015-01-22 16:19:56
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Tama二等兵

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by yln819 at 2014-06-27 11:51:08
接近3000bp,多少ug没有计算，这个必须算着加吗？...

我一般这样：50ul体系酶切，质粒1.5ug，5ul的buffer，2ul的酶，切胶后过柱回收，条带不亮的回收时加入异丙醇
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50楼2015-06-11 01:15:04
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