应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » ＰＣＲ产物跑电泳，随着跑电泳时间的增加，，条带会下移，最后竟然消失了，怎么回事呀
261/3返回列表123下一页
查看: 3643  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

韩元富豪

金虫 (小有名气)

[求助] ＰＣＲ产物跑电泳，随着跑电泳时间的增加，，条带会下移，最后竟然消失了，怎么回事呀 已有15人参与

做了很久的PCR，一直是引物二聚体，昨天变化了PCR程序，没有引物二聚体了，出现了单一的目的条带，但发现，随着跑电泳时间的增加，，条带会下移，刚开始很亮，然后于是直接纯化，跑电泳， 竟然什么也没有，今天又做了一次，重新配了胶，又做了一次ＰＣＲ，还是出现了单一条带，特地每隔１０分钟用成像仪看一下，结果还是做天那样，随着时间的增加，条带会下移，最后都消失了，把PCR产物也纯化了，跑电泳还是什么都没有，怎么回事啊，该怎么办（模板ＤＮＡ又跑了一遍，没有降解）
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-11 21:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-12 10:44:45
染料跑出去了当然看不到啦

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-05-11 23:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zuolihui001

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-12 10:44:55
条带跑得时间太长，跑到胶外面去了吧！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-11 21:17:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Davidzjy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-12 10:45:03
不知道LZ是怎么定义胶中"上下左右"的
如果你说的"下移"是沿电流方向的移动 那么这是完全正常的现象
时间越长条带跑得越远嘛
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-11 22:50:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daxulalala

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-12 10:45:11
你用的什么染料啊，是EB吗？加到胶里的还是跑完染色啊？
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-12 00:09:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zuolihui001 at 2014-05-11 21:17:56
条带跑得时间太长，跑到胶外面去了吧！

那这单一的条带是不是我的目的条带呢？一般ＰＣＲ产物跑电泳，电压，时间大概怎么确定，我的l两个PCR产物是281bp和350bp
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-12 08:49:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-11 23:00:07
染料跑出去了当然看不到啦

那这单一的条带是不是我的目的条带呢？一般ＰＣＲ产物跑电泳，电压，时间大概怎么确定，我的l两个PCR产物是281bp和350bp
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-12 08:50:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by daxulalala at 2014-05-12 00:09:22
你用的什么染料啊，是EB吗？加到胶里的还是跑完染色啊？

不是EB，是glostine，是胶溶化后加到胶了的，我都不知道现在的条带是不是我想要的了，位置一直在变，纯化后，跑电泳什么也没有
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-12 08:52:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shucanwei

木虫 (正式写手)
有图吗？
回复此楼
唯以一人治天下，不以天下奉一人。
9楼2014-05-12 09:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by shucanwei at 2014-05-12 09:07:43
有图吗？

没有，那个成像仪不带照相功能，就是ＰＣＲ条件优化的时候，一直是只有引物二聚体，而且都很亮，前天条件优化了，终于没有了，只有单一的条带，应该不是引物二聚体，跑２０分钟，就在我的应该出现目的条带的位置，和ｍａｒｋｅｒ对比的，在跑１０分钟，在看，条带就下移了，再跑１０　分钟，条带就没有了，因为只有单一条带，就直接纯化了，没有切胶回收，跑电泳后，什么也没有
赞一下 回复此楼
10楼2014-05-12 09:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 韩元富豪 的主题更新
261/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭