应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » ＰＣＲ产物跑电泳，随着跑电泳时间的增加，，条带会下移，最后竟然消失了，怎么回事呀
262/3返回列表上一页123下一页
查看: 3892  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shucanwei

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 韩元富豪 at 2014-05-12 09:25:22
没有，那个成像仪不带照相功能，就是ＰＣＲ条件优化的时候，一直是只有引物二聚体，而且都很亮，前天条件优化了，终于没有了，只有单一的条带，应该不是引物二聚体，跑２０分钟，就在我的应该出现目的条带的位置， ...

在跑１０分钟，在看，条带就下移了，再跑１０　分钟，条带就没有了（此时marker在吗？）
赞一下 回复此楼
唯以一人治天下，不以天下奉一人。
11楼2014-05-12 09:53:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinlizhangli

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-12 15:19:38
目的条带比较小，电压不需要太高，时间也不需要太长、、、电压高了或时间长了 自然会跑出去看不到了、、、
赞一下 回复此楼
12楼2014-05-12 11:15:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-12 15:19:44
1.你既然你的PCR已经得到单一条带根本不用每隔几分钟看一次条带，条带肯定越跑越下。一般你点样的时候需要和loading buffer混合吧，跑的时候你看你胶上的那条蓝带，跑到离胶边缘1cm就可以了，跑胶时间还和你胶浓度和基因大小有关。
2.纯化的亲和柱都是有一个回收量程的，比如只能亲和200bp——10KB的基因，你的基因也就200——300bp，你好好看看说明书上标注的回收量程，是不是你的基因就不在量程里。就算是在量程里，很多公司的纯化试剂盒对过小的DNA回收效果都很差。你多P管，把这几管同时过一个柱子纯化看看能出来东西不，不行的话就换其他公司的试剂盒纯化或者割胶回收试剂盒。
赞一下 回复此楼
大家相互帮助哈
13楼2014-05-12 15:02:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

906394648

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-01 17:05:47
跑的时间太长了，一般琼脂糖电泳最好的情况15-20min就能跑完，你应该看看MAKER跑的怎么样
赞一下 回复此楼
14楼2014-05-13 19:19:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ws110422

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-06-01 17:05:56
你的意思是，比如原本条带出现在300bp的位置，再跑10分钟，跑到200bp的位置了么？会不会是染料的问题，我们实验室前阵子换了个染料，跑胶的时候会在目的条带附近也有一条挺亮的带，但不是目的条带，跑的时间长了就能跟目的条带分开了，目的条带和那条染料带亮的不一样
赞一下 回复此楼
15楼2014-05-13 19:48:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiminlee

木虫 (小有名气)

Capital

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
方向放反了吧。应放在阴极。核酸带负电的。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
不想当将军的士兵不是一个好船长
16楼2014-05-14 11:01:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiminlee

木虫 (小有名气)

Capital

【答案】应助回帖

还有就是离孑强度和pH值有无问题

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
不想当将军的士兵不是一个好船长
17楼2014-05-14 11:05:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冉兆星

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 韩元富豪 at 2014-05-12 08:50:38
那这单一的条带是不是我的目的条带呢？一般ＰＣＲ产物跑电泳，电压，时间大概怎么确定，我的l两个PCR产物是281bp和350bp...

你怎么不点Marker？
赞一下 回复此楼
18楼2014-05-14 11:20:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咸鱼~翻身

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 韩元富豪 at 2014-05-12 09:25:22
没有，那个成像仪不带照相功能，就是ＰＣＲ条件优化的时候，一直是只有引物二聚体，而且都很亮，前天条件优化了，终于没有了，只有单一的条带，应该不是引物二聚体，跑２０分钟，就在我的应该出现目的条带的位置， ...

向下扩散。
回复此楼
19楼2014-07-31 09:44:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
韩元富豪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:33:36
过柱回收的时候，有的是400bp以下的需要加异丙醇才能回收到的。或者你直接乙醇沉淀。
赞一下 回复此楼
20楼2014-07-31 17:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 韩元富豪 的主题更新
262/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +9 xqy2009 2026-10-13 11/550 2026-10-15 16:37 by beefly
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭