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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » ＰＣＲ产物跑电泳，随着跑电泳时间的增加，，条带会下移，最后竟然消失了，怎么回事呀
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北化方华

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by 韩元富豪 at 2014-05-12 09:25:22
没有，那个成像仪不带照相功能，就是ＰＣＲ条件优化的时候，一直是只有引物二聚体，而且都很亮，前天条件优化了，终于没有了，只有单一的条带，应该不是引物二聚体，跑２０分钟，就在我的应该出现目的条带的位置， ...

你继续跑电泳的话应该会下移啊，因为有电流啊，而且marker应该也继续跑啊，你可以在最亮的时候做胶回收啊。
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21楼2014-08-06 16:25:30
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wangling209

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

跑的时间太长了，跑到胶外面去了
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22楼2014-08-10 08:41:03
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
韩元富豪(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-11-26 10:17:11
我个人认为：最可能是：
1.DNA的 分子量和凝胶的规格不符合，导致DNA在凝胶上移动过快；
2.电流可能大了些，时间稍长些，DNA就被推下了凝胶；
3.凝胶不均匀，靠近凝胶边缘的后半部分可能胶浓度太稀了；
4.电流或者电压不稳定，在后10分钟里可能电流或者电压由于电路原因变大了，于是DNA被推下了凝胶；
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23楼2014-08-20 12:17:07
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王程程510

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-26 10:17:32
引用回帖:
15楼: Originally posted by ws110422 at 2014-05-13 19:48:34
你的意思是，比如原本条带出现在300bp的位置，再跑10分钟，跑到200bp的位置了么？会不会是染料的问题，我们实验室前阵子换了个染料，跑胶的时候会在目的条带附近也有一条挺亮的带，但不是目的条带，跑的时间长了就能 ...

你要和marker的位置对应着看，不明白你说的是对应于marker条带的位置越来越往下，还是对应marker条带位置没变，只是随电泳时间增加在胶上位置越来越靠近下端。如果是后者，那是正常的啊，本来就是随电泳时间增加，条带离上样孔越远
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24楼2014-09-28 08:53:40
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werq63

金虫 (著名写手)
★
韩元富豪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-26 10:17:22
我有次  电泳液PH有问题出现了条带下移直到消失染料变色 的情况 重新配下电泳液（包括造胶和电泳槽中的） 还有可能是你的胶和槽之间有缝隙 重力作用下跑到电泳液里的
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25楼2014-11-25 22:54:16
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Tama二等兵

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 韩元富豪 at 2014-05-12 09:25:22
没有，那个成像仪不带照相功能，就是ＰＣＲ条件优化的时候，一直是只有引物二聚体，而且都很亮，前天条件优化了，终于没有了，只有单一的条带，应该不是引物二聚体，跑２０分钟，就在我的应该出现目的条带的位置， ...

产物大小是多少？你的意思就是扩完pcr然后点了检测，发现条带是单一的，就把产物直接过柱回收的是么？然后过完柱发现点检测没有是么？请问用的什么洗脱液？
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26楼2015-06-12 02:50:16
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