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美丽的家园金虫 (正式写手)
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跑PCR,琼脂糖电泳没有条带出现
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新手,还望大家指正! 真菌总DNA提取,琼脂糖(0.8%)电泳 检测,是有亮带的,PCR后检测,却无. 模板 DNA 1μL,10×PCR buffer(MgCl2 20 mmol/L) 2.50 μL,dNTPs(10 mmol/L 0.5μL,10 μmol/L的正向引物 0.5 μL,10 μmol/L反向引物0.5μL,5 U/ μL Taq DNA Polymerase 0.200 μL,加ddH2O 补足至25.00 μL。PCR扩增条件:94℃预变性5 min,95℃变性50 s,53℃复性40 s,72℃延伸 50 s,30个循环,72℃延伸5 min。 跑PCR失败,为什么呢? 有时maker 条带很暗,不是染色剂(Gelred)剂量问题,怎么回事呢? |
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0.5μL,10 μmol/L的正向引物 0.5 μL,10 μmol/L反向引物0.5μL,5 U/ μL Taq DNA Polymerase 0.200 μL,加ddH2O 补足至25.00 μL。
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