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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳后发现目的条带偏大是什么原因
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wyf625356

铁虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳后发现目的条带偏大是什么原因 已有1人参与

最近在做易错PCR,但是PCR后电泳有偏大约100bp，我的目的基因为1100bp，但是从胶图中可以看到这个应该有1200bp了，这是什么情况，希望高手指点，开始怀疑是离子浓度的影响，但是纯化后也是相同的情况
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1楼 2012-12-04 21:02:15
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wyf625356: 金币+2, ★有帮助 2012-12-05 12:58:24
你可以测序看看，我这次做克隆，目的片段是1300，回收的时候也是，可是连入T载体以后，然后菌批，不知怎么回事就是1000左右，但是拿出去测序，是对着的
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2楼2012-12-04 21:53:33
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wyf625356: 金币+1, ★有帮助 2012-12-05 12:58:34
我也出现过这种情况，我的片段大约为1500，跑出的胶却在1700左右，但测序结果是对的
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3楼2012-12-04 22:12:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wyf625356: 金币+1, ★有帮助 2012-12-05 12:58:51
胶上看分子量不完全准确，这种情况时有发生。测序正确就可以了。
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4楼2012-12-05 08:01:45
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minlei219

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
wyf625356: 金币+1, ★有帮助 2012-12-05 12:59:00
本帖内容被屏蔽
5楼2012-12-05 11:01:06
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seanzhu1996

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶电泳分析只能定性，不一定非常准确，尤其是条带的大小判断，主要还是要测序以及酶切才能检验结果。
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享受每天的生活
6楼2012-12-05 15:43:32
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上演空城计

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你可以适当增加电压和延长跑胶的时间试试，希望对你有帮助
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不努力你连空城都得不到
7楼2014-12-06 22:54:13
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