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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA琼脂糖凝胶电泳
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yeshui

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA琼脂糖凝胶电泳

在跑琼脂糖凝胶电泳的过程中，那个loadingbuffer越来越浅，是怎么回事啊？之前上样的时候很蓝的，我做的是PCR筛选，然后把产物全加进去了
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1楼 2011-10-27 10:32:38
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liukgg

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

跑的过程中弥散了，对结果没什么影响，只要注意一下不要将自己的条带跑出去就可以
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山水凤凰
2楼2011-10-27 11:04:28
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yeshui

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liukgg at 2011-10-27 11:04:28:
跑的过程中弥散了，对结果没什么影响，只要注意一下不要将自己的条带跑出去就可以

可是跑完连Marker的带都没有了啊，我确定我上了
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3楼2011-10-27 11:47:45
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浩然103

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

yeshui(金币+4): 2011-10-27 15:32:22
有没有可能是以下几个原因：
1.DNA的上样量不够。
2.DNA降解。
3.DNA走出凝胶。
可以加大DNA的量；避免核酸酶污染；缩短电泳时间，降低电压，增大凝胶浓度。
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4楼2011-10-27 12:01:26
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yeshui

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 浩然103 at 2011-10-27 12:01:26:
有没有可能是以下几个原因：
1.DNA的上样量不够。
2.DNA降解。
3.DNA走出凝胶。
可以加大DNA的量；避免核酸酶污染；缩短电泳时间，降低电压，增大凝胶浓度。

我把所有的PCR产物都加进去了啊，可是Marker也降解了吗？两块胶一块跑的，另一块没事啊，奇了怪了
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5楼2011-10-27 15:28:39
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peace12039088

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yeshui at 2011-10-27 15:28:39:
我把所有的PCR产物都加进去了啊，可是Marker也降解了吗？两块胶一块跑的，另一块没事啊，奇了怪了

你的两块胶是同时制作的一模一样的胶吗？会不会是胶的问题？
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6楼2011-10-27 15:45:14
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匿名

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7楼2011-10-27 15:48:32
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chenlimei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

再做一遍试试，做多了才能找出原因
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8楼2011-10-27 16:58:34
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congconglyr

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by yeshui at 2011-10-27 10:32:38:
在跑琼脂糖凝胶电泳的过程中，那个loadingbuffer越来越浅，是怎么回事啊？之前上样的时候很蓝的，我做的是PCR筛选，然后把产物全加进去了

可能是你的胶浓度太小了，或者电压太大。不同仪器的设定是不一样的，需要你去摸索啊！
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9楼2011-10-27 17:14:26
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yeshui

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-27 15:45:14:
你的两块胶是同时制作的一模一样的胶吗？会不会是胶的问题？

是啊，另一块挺好的啊，同时制的胶倒的板啊
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10楼2011-10-27 17:26:03
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