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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳时EB用量问题 已有7人参与

做琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,在琼脂糖凝胶中加多少量的EB?我定的EB是12g/ml的.我要稀释到多少浓度,加多少到胶中。大概的量都可以。谢了
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主


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讲的是泡胶。全部浸泡。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-10-12 15:07:16
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feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶

我木有配过EB  不晓得浓度  但是我们这边一大板胶(100ml)是加5微升就够了,
会不会偶尔也会想起我....
3楼2010-10-12 15:10:55
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
半滴就足够了啊。
4楼2010-10-12 15:14:33
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jxl2819

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by piaoyuaaa at 2010-10-12 15:00:40:
做琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,在琼脂糖凝胶中加多少量的EB?我定的EB是12g/ml的.我要稀释到多少浓度,加多少到胶中。大概的量都可以。谢了

可以不用稀释吧,直接用小枪头点一下,然后混在倒好平板但还没有凝固的胶里,然后混匀,就可以了。
long-l-j
5楼2010-10-12 15:36:59
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢交流~ 2010-10-12 18:26:08
终浓度0.5ug/ml就够

你的EB是EB是12g/ml的?写错了吧,12mg/ml还差不多

一般就是粘上一滴就行,或者吸上一两微升足够了,不用太精确
6楼2010-10-12 15:41:27
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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by jxl2819 at 2010-10-12 15:36:59:



可以不用稀释吧,直接用小枪头点一下,然后混在倒好平板但还没有凝固的胶里,然后混匀,就可以了。

恩,好的,谢谢,你知不知道垂直电泳槽可以不可以做琼脂糖凝胶电泳?
7楼2010-10-12 15:50:23
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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-12 15:41:27:
终浓度0.5ug/ml就够

你的EB是EB是12g/ml的?写错了吧,12mg/ml还差不多

一般就是粘上一滴就行,或者吸上一两微升足够了,不用太精确

好的,谢谢,请问你知道不知道垂直电泳槽可不可以做琼脂糖凝胶电泳?
8楼2010-10-12 15:52:27
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+3):欢迎发帖交流! 2010-10-12 19:36:14
引用回帖:
Originally posted by piaoyuaaa at 2010-10-12 15:52:27:

好的,谢谢,请问你知道不知道垂直电泳槽可不可以做琼脂糖凝胶电泳?

这个真没做过,貌似不行吧
一是凝胶强度可能有问题,那么薄的琼脂糖胶应该很不结实

二是电压电流可能没法控制,电压低了跑不动,电压高了烧了

三是长时间电泳导致的EB迁移不能忽略,除非电泳后染胶,板子太大的话不方便吧,琼脂糖银染?没见过诶。。。。。。。。

有必要用垂直槽跑琼脂糖么?大片段水平槽跑很好啊,小片段琼脂糖也分不开,还是要PAGE
9楼2010-10-12 15:58:18
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jxl2819

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
[quote]Originally posted by piaoyuaaa at 2010-10-12 15:50:23:

恩,好的,谢谢,你知不知道垂直电泳槽可以不可以做琼脂糖凝胶电泳? [/quote

我也没有听说过用垂直电泳槽跑琼脂糖凝胶电泳的,垂直电泳槽太薄了。
    我只知道用聚丙烯酰胺凝胶电泳高于琼脂糖凝胶电泳,如果你的DNA小于1Kb,或者想做DNA序列分析的话倒可以用聚丙烯酰胺凝胶电泳
long-l-j
10楼2010-10-12 16:09:58
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