加到胶里会比较好些

7楼2010-11-26 14:36:01

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普通回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wickhamhan(金币+1): 2010-11-26 12:54:46

都可以的，看你习惯了，实验室是制胶时加，

2楼2010-11-26 12:53:28

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feng__

金虫 (著名写手)

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★
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我们都是配胶的时候加！

溶好后冷却到不烫手，加入EB，混匀，倒胶！

3楼2010-11-26 13:12:14

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墨香若水

木虫 (著名写手)

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★
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加在胶里面

4楼2010-11-26 13:12:54

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lyfei999

金虫 (正式写手)

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冷却后加

5楼2010-11-26 14:18:08

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jykjt

木虫 (正式写手)

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★
wickhamhan(金币+1):谢谢参与

制胶时加

6楼2010-11-26 14:29:53

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一碗水端平

木虫 (职业作家)

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★
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直接加到凝胶中

8楼2010-11-26 15:09:53

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kevinxin

禁虫 (小有名气)

★
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9楼2010-11-26 15:19:02

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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★
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1949stone(金币+2):正解 2010-11-26 15:43:26

是的
等胶冷却到大约60度加EB摇匀就行了
注意温度哦
大高了，对EB不好
太低了，胶就开始凝了，EB可能摇不匀的

10楼2010-11-26 15:31:18

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wsmcc

金虫 (小有名气)

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★
wickhamhan(金币+1):谢谢参与

都可以的。提前加进去的话效果比较好，如果是验证之类的，跑完电泳跑胶也挺好的，虽然效果不如直接加到胶里好，但是我觉得更安全些。毕竟EB加热会分解的。

11楼2010-11-26 15:37:54

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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
wickhamhan(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-11-26 23:24:20

引用回帖:

Originally posted by wickhamhan at 2010-11-26 12:51:00:
大家做琼脂糖凝胶电泳时，是EB加入到工作液中，还是跑完电泳再在EB中染色？哪种效果好？

现在很多实验室基本上都是将EB或者goldview加到胶里，跑完电泳甚至在可见光下也可以看到条带，方便。
但以前都是先跑胶，然后在EB溶液里染色，这样既减少了污染，还具有较高的分辨率，但是操作比较繁琐。

现在我们实验室对敏感性比较高的PFGE还是用EB来染色，普通的电泳是将Goldview直接加到胶里。

12楼2010-11-26 16:51:53

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zgb1982

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★
wickhamhan(金币+1):谢谢参与

LS说的是，之前实验室就是跑胶的地方为非隔离区，有块隔离区用来跑完后用EB溶液浸泡15分钟左右，照相。现在用一种花青素类的东西。是和LOADINGBUFFER 一起加的跑的。

13楼2010-11-26 17:08:15

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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

★
wickhamhan(金币+1):谢谢参与

都可以

DNA电泳染色可以分为点染，胶染，泡染，不懂就百度一下，这是基本常识

14楼2010-11-26 17:31:12

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天使托

专家顾问 (职业作家)

★
wickhamhan(金币+1):谢谢参与

一般就是配胶时添加的，不过用EB时可要注意啊~我们实验室现在用goldview，低毒！

15楼2010-11-26 17:50:17

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skkyy88888

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★
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可以跑完电泳染，也可以在倒胶的时候加。

16楼2010-11-26 17:52:12

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lhwei1987

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★
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我们是跑完胶染色

17楼2010-11-26 19:48:47

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dy_414

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★ ★ ★ ★
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scelab(金币+3):有意思~ 2010-11-26 23:25:14

溶胶的玻璃瓶在戴着乳胶手套和PE手套的手背上可以停留7秒（皮糙肉厚的男生）或5秒（细皮嫩肉的女生）以上，就是默认<60℃，这时候可以加EB了

18楼2010-11-26 22:10:15

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ccz3099

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加在胶里面

19楼2010-11-26 23:11:45

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云横秦岭

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★
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跑完胶，再加染色，污染少

20楼2010-11-26 23:31:11

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玉米虫

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★
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制胶过程中加，冷却到不是很烫手的时候加。加早了EB要挥发出来

21楼2010-11-26 23:39:12

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tigertang

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dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-27 08:41:30

经典的方法是跑完胶后，用EB染胶
通常的做法就是制胶时，在倒胶前加到胶里或直接加到电泳液里

经典方法的好处是实验室比较好控制EB的污染，但对于高浓度的胶（>2%）效果不好。

23楼2010-11-27 00:50:27

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bigboy123

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★
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其实加那里都管用，只要时刻记得EB对皮肤有致癌性就可以了。我们以前都有徒手做的，非常佩服！
现在有一种信号更强烈的染料替代物，不过后来听说也是有点致癌性的。

24楼2010-11-27 11:05:16

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lixiaomin8611

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★
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一般是制胶时加，感觉这样效果比较好，不过也要等胶冷却至无蒸汽，以免EB随之蒸发~弄得空气中有毒就不好了~~

25楼2010-11-27 14:12:40

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wmqouc

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★
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也就是前染和后染了
其实效果差不多
后染污染的区域比前染小一些

26楼2010-11-28 15:06:46

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-超越beyond

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加到胶里会比较好些

★ ★
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silicare(金币+1):鼓励新虫参与 2010-11-29 12:04:01

配好胶后，稍冷却后，用枪加一点就行，然后摇匀、倒胶。
注意eb致癌，小心。

27楼2010-11-29 10:42:35

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taotao4108

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还是换掉吧，现在很少有实验室还用EB了，我们以前都用GelRed，挺不错的，好用不贵，对人没有伤害

赞一下

28楼2010-11-30 12:47:08

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bigbangrex

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★
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我们是跑完电泳后再染色的，效果差不多，但是要注意染色时间要长。

29楼2010-11-30 13:25:52

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clare420

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★
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可以做胶的时候加在胶里，大概50-60度的时候加，或者在样品里加也可以，就是样品，loading,EB加在一起，再点到胶孔里

30楼2010-11-30 15:54:19

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yixinyuan

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我们都是制胶时候加入EB的，凝胶冷却不烫时候加入摇匀倒入制胶槽。