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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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他她0328

银虫 (小有名气)

[求助] 酶切以后没有条带

随机酶切后0.5%的琼脂糖凝胶电泳检测,一点条带都没有,请问是怎么回事?
酶切体系: gDNA      10微克
           10 × buffer       40微升
           酶            1 U
                   双蒸水     至 400微升
37℃水浴30min。
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yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


他她0328(金币+1): 2011-10-09 17:00:31
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-10 17:16:22
为什么要搞这么大的体系?还有你照胶时用EB染色没?再有就是可能切碎了,浓度又低,就看不出来了
在等待中涅槃重生
2楼2011-10-09 13:51:31
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这么大体系……可能是太稀了吧
显微镜下的世界很精彩!
3楼2011-10-09 14:03:38
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amilie030312

金虫 (正式写手)

1U的酶你用400微升的体系,没搞懂要做啥
4楼2011-10-09 14:33:08
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 问得好 2011-10-10 17:16:12
你确定酶只用一个单位??而且体系是400微升,这个体系从哪借鉴的??
5楼2011-10-09 16:45:21
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他她0328

银虫 (小有名气)

wanhscn(金币+2): 热心! 2011-10-15 23:10:41
wanhscn(金币-2): 2011-10-15 23:13:46
引用回帖:
1楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-10-09 13:37:18:
随机酶切后0.5%的琼脂糖凝胶电泳检测,一点条带都没有,请问是怎么回事?
酶切体系: gDNA      10微克
           10 × buffer       40微升
           酶            1 U
                   双蒸水      ...

这是我的实验方案
1)配制酶切分析缓冲液:
gDNA   l0ug
Buffer  40ul
ddH2O到400ul
2)在冰上按以下制备反应体系
管号 体系
1. 40 u l酶切分析缓冲液+1 IU 酶
2. 20u l酶切分析缓冲液+20u l管1
3. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管2
……
10. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管9

这里做的是确定一下最佳酶量,然后再做酶切。
6楼2011-10-09 17:06:24
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他她0328

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by amilie030312 at 2011-10-09 14:33:08:
1U的酶你用400微升的体系,没搞懂要做啥

这是我的实验方案
1)配制酶切分析缓冲液:
gDNA   l0ug
Buffer  40ul
ddH2O到400ul
2)在冰上按以下制备反应体系
管号 体系
1. 40 u l酶切分析缓冲液+1 IU 酶
2. 20u l酶切分析缓冲液+20u l管1
3. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管2
……
10. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管9

这里做的是确定一下最佳酶量,然后再做酶切。
7楼2011-10-09 17:06:50
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他她0328

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by amilie030312 at 2011-10-09 14:33:08:
1U的酶你用400微升的体系,没搞懂要做啥

这是我的实验方案
1)配制酶切分析缓冲液:
gDNA   l0ug
Buffer  40ul
ddH2O到400ul
2)在冰上按以下制备反应体系
管号 体系
1. 40 u l酶切分析缓冲液+1 IU 酶
2. 20u l酶切分析缓冲液+20u l管1
3. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管2
……
10. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管9

这里做的是确定一下最佳酶量,然后再做酶切。
8楼2011-10-09 17:07:02
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他她0328

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuxia82012 at 2011-10-09 13:51:31:
为什么要搞这么大的体系?还有你照胶时用EB染色没?再有就是可能切碎了,浓度又低,就看不出来了

这是我的实验方案
1)配制酶切分析缓冲液:
gDNA   l0ug
Buffer  40ul
ddH2O到400ul
2)在冰上按以下制备反应体系
管号 体系
1. 40 u l酶切分析缓冲液+1 IU 酶
2. 20u l酶切分析缓冲液+20u l管1
3. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管2
……
10. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管9

这里做的是确定一下最佳酶量,然后再做酶切。
9楼2011-10-09 17:16:39
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他她0328

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wzqno at 2011-10-09 16:45:21:
你确定酶只用一个单位??而且体系是400微升,这个体系从哪借鉴的??

这是我的实验方案
1)配制酶切分析缓冲液:
gDNA   l0ug
Buffer  40ul
ddH2O到400ul
2)在冰上按以下制备反应体系
管号 体系
1. 40 u l酶切分析缓冲液+1 IU 酶
2. 20u l酶切分析缓冲液+20u l管1
3. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管2
……
10. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管9

这里做的是确定一下最佳酶量,然后再做酶切。
10楼2011-10-09 17:16:55
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