酶切以后没有条带 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

在等待中涅槃重生

11楼2011-10-09 18:15:55

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天使托

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T.Shen

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西瓜: 1楼提到buffer是10X的，400微升体系应该就是加40微升吧。 2011-10-10 17:18:46

buffer 为什么要这么多，你这个体系也太不合理了吧。。。。

Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

12楼2011-10-09 19:40:33

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他她0328

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12楼: Originally posted by 天使托 at 2011-10-09 19:40:33:
buffer 为什么要这么多，你这个体系也太不合理了吧。。。。

我参考文献上的。。。以前从来没做过分子，现在无从下手了都。。。

13楼2011-10-09 19:45:38

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asznpb

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西瓜(金币+1): 鼓励 2011-10-10 17:17:26

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13楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-10-09 19:45:38:
我参考文献上的。。。以前从来没做过分子，现在无从下手了都。。。

你的体系太大了，不知道你是干什么用，所以没法评论，如果你是需要大量酶切做杂交的话当然大体系，但是你又分成10小管，切那么多干啥啊？

显微镜下的世界很精彩！

14楼2011-10-09 20:41:14

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wzqno

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你这是半倍稀释法确定最适合的酶用量，不过最开始用的酶确定是1个单位？？太少了点吧

15楼2011-10-10 22:37:18

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他她0328

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15楼: Originally posted by wzqno at 2011-10-10 22:37:18:
你这是半倍稀释法确定最适合的酶用量，不过最开始用的酶确定是1个单位？？太少了点吧

终于有人看懂这个实验方案了。。。最开始的酶量确实是1个单位，重点是水浴30min后，跑胶以后没有任何条带，如果是酶量不够，至少DNA的条带应该是有的啊。。。

16楼2011-10-11 12:55:18

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amilie030312

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★ ★
wanhscn(金币+2): 热心！ 2011-10-15 23:11:57

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16楼: Originally posted by 他她0328 at 2011-10-11 12:55:18:
终于有人看懂这个实验方案了。。。最开始的酶量确实是1个单位，重点是水浴30min后，跑胶以后没有任何条带，如果是酶量不够，至少DNA的条带应该是有的啊。。。

我给你个优化体系的表，不知道你能不能用得上，如果用不上就说明我理解错了就当我画着玩吧。

17楼2011-10-12 13:23:04

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amilie030312

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西瓜(金币+4): 很热心哦！ 2011-10-15 20:11:13

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17楼: Originally posted by amilie030312 at 2011-10-12 13:23:04:
我给你个优化体系的表，不知道你能不能用得上，如果用不上就说明我理解错了就当我画着玩吧。

然后再在这个基础上进行酶量，DNA量，反应时间等等的修改。不过基本上常规的实验这样已经完全可以做好了。

18楼2011-10-12 13:24:30

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他她0328

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18楼: Originally posted by amilie030312 at 2011-10-12 13:24:30:
然后再在这个基础上进行酶量，DNA量，反应时间等等的修改。不过基本上常规的实验这样已经完全可以做好了。

谢谢啊，我试试

19楼2011-10-15 09:22:06

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XI4ZHL

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wanhscn(金币+1): 鼓励交流！ 2011-10-15 23:33:08
wanhscn(金币+3): 同意，有道理，看问题很细！ 2011-10-15 23:36:58

肯定看不出来，本来就是10ug ，你又稀释到400 ，你想想你点样的浓度多稀啊，以前我也这样做过，肯定看不见

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