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他她0328

银虫 (小有名气)

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[求助] 酶切以后没有条带

随机酶切后0.5%的琼脂糖凝胶电泳检测，一点条带都没有，请问是怎么回事？
酶切体系： gDNA    10微克
         10 × buffer    40微升
         酶          1 U
               双蒸水    至 400微升
37℃水浴30min。

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1楼2011-10-09 13:37:18

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他她0328

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by amilie030312 at 2011-10-09 14:33:08:
1U的酶你用400微升的体系，没搞懂要做啥

这是我的实验方案
1)配制酶切分析缓冲液：
gDNA l0ug
Buffer 40ul
ddH2O到400ul
2)在冰上按以下制备反应体系
管号体系
1. 40 u l酶切分析缓冲液+1 IU 酶
2. 20u l酶切分析缓冲液+20u l管1
3. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管2
……
10. 20u 1酶切分析缓冲液+20u l管9

这里做的是确定一下最佳酶量，然后再做酶切。