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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳时EB用量问题 已有7人参与

做琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,在琼脂糖凝胶中加多少量的EB?我定的EB是12g/ml的.我要稀释到多少浓度,加多少到胶中。大概的量都可以。谢了
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~ 2010-10-12 18:26:08
终浓度0.5ug/ml就够

你的EB是EB是12g/ml的?写错了吧,12mg/ml还差不多

一般就是粘上一滴就行,或者吸上一两微升足够了,不用太精确
6楼2010-10-12 15:41:27
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
amisking(金币+3):欢迎发帖交流! 2010-10-12 19:36:14
引用回帖:
Originally posted by piaoyuaaa at 2010-10-12 15:52:27:

好的,谢谢,请问你知道不知道垂直电泳槽可不可以做琼脂糖凝胶电泳?

这个真没做过,貌似不行吧
一是凝胶强度可能有问题,那么薄的琼脂糖胶应该很不结实

二是电压电流可能没法控制,电压低了跑不动,电压高了烧了

三是长时间电泳导致的EB迁移不能忽略,除非电泳后染胶,板子太大的话不方便吧,琼脂糖银染?没见过诶。。。。。。。。

有必要用垂直槽跑琼脂糖么?大片段水平槽跑很好啊,小片段琼脂糖也分不开,还是要PAGE
9楼2010-10-12 15:58:18
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