24小时热门版块排行榜    

查看: 2890  |  回复: 16

swq0021

新虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】DNA-这个电泳怎么跑呢???

初做电泳 很多东西不太了解 想向各位大侠请教下
我的DNA是个杂交的双链DNA 23bp   比较短
想跑个琼脂糖凝胶电泳 可是有人告诉我说这个分子量太小 要跑聚丙烯酰胺的
请问大侠们 这样的DNA跑哪种好些呢 凝胶的比例大概多少合适
跪谢了!

谢谢大家的回复,肯定是要用聚丙烯酰胺了,谢谢大家!
可是实验中还有个问题,胶的配置和缓冲液都是用的TBE,上样的DNA的溶液是BA溶液(20 mM的Tris , 0.5 M的NaCl ,PH8.0),加了溴酚蓝,通电后发现溴酚蓝动的很慢,而且偏着,歪七扭八的,师兄的样品是水溶液,没有这个问题,我的是盐的影响还是PH影响了呢?

[ Last edited by swq0021 on 2010-12-2 at 14:00 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁伴我闯荡

至尊木虫 (著名写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
条带太小了 还是跑聚丙稀酰胺的吧 琼脂糖凝胶看不到的
2楼2010-11-30 09:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

skkyy88888

铜虫 (著名写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
聚丙稀酰胺
3楼2010-11-30 12:15:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taotao4108

金虫 (正式写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
肯定要跑聚丙烯酰胺凝胶,具体可以参考分子生物学试验或者分子克隆等等,讲的很详细
4楼2010-11-30 12:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swq0021(金币+1):谢谢参与
琼脂糖电泳用来分离0.2k-20k的片段,你的这个一定不能用琼脂糖电泳来跑
5楼2010-11-30 12:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swq0021(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by taotao4108 at 2010-11-30 12:25:58:
肯定要跑聚丙烯酰胺凝胶,具体可以参考分子生物学试验或者分子克隆等等,讲的很详细

这个是正解
6楼2010-11-30 12:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw1989960

木虫 (正式写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
聚丙稀酰胺凝胶电泳吧!
7楼2010-11-30 14:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

-超越beyond

铁虫 (小有名气)



swq0021(金币+1):谢谢参与
聚丙稀酰胺
8楼2010-11-30 17:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eileenjn

银虫 (小有名气)



swq0021(金币+1):谢谢参与
聚丙烯酰胺凝胶电泳,片段太小
9楼2010-12-01 11:18:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
12%的聚丙烯酰胺凝胶电泳
可以银染,EB染色也没问题。
10楼2010-12-01 17:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huchuanlu5

银虫 (小有名气)



swq0021(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by skkyy88888 at 2010-11-30 12:15:49:
聚丙稀酰胺

同意以上见解,正确。
11楼2010-12-01 18:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swq0021

新虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by yuanbo934 at 2010-12-01 17:06:03:
12%的聚丙烯酰胺凝胶电泳
可以银染,EB染色也没问题。

谢谢你,谢谢大家的回复,肯定是要用聚丙烯酰胺了,谢谢大家!
可是实验中还有个问题,胶的配置和缓冲液都是用的TBE,上样的DNA的溶液是BA溶液(20 mM的Tris , 0.5 M的NaCl ,PH8.0),加了溴酚蓝,通电后发现溴酚蓝动的很慢,而且偏着,歪七扭八的,师兄的样品是水溶液,没有这个问题,我的是盐的影响还是PH影响了呢?
12楼2010-12-02 13:52:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

swq0021

新虫 (小有名气)


有人知道吗
13楼2010-12-03 08:49:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hailiang1029

金虫 (正式写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
是有点小,不过如果用琼脂糖也可以,我做的70bp的分的很清楚,50bp也可以,只是胶浓度大一点,比如4%,然后跑的时候电泳很低,60—80V,跑几个小时,注意降温就好了,可以试一下,应该可以
14楼2010-12-03 09:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlrwindbell

木虫 (著名写手)



swq0021(金币+1):谢谢参与
聚丙稀酰胺
15楼2010-12-03 09:12:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nanzheyi

木虫 (小有名气)



swq0021(金币+1): 谢谢参与
可以跑琼脂糖的,今天刚跑的,在紫外灯下可以看到,是28个碱基对的,琼脂糖浓度2%,有人用过3%的跑过十几个碱基对的,但是跑完之后凝胶放置三个小时后就看不到条带了。
16楼2012-04-11 20:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可帅儿

银虫 (正式写手)



swq0021(金币+1): 谢谢参与
诶,我本来也打算问这个问题的。我的目的基因是200bp左右,用的是琼脂糖电泳跑的,除了个别的有条带,其他一律木有!很桑心啊~
是不是琼脂糖跑的都是500bp以上的?小片段用聚丙烯酰胺电泳?是垂直的还是水平的?
17楼2012-04-13 18:31:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 swq0021 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:50 by k7OM8YghWbkC
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 5/250 2026-08-04 04:44 by k7OM8YghWbkC
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 04:41 by k7OM8YghWbkC
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备? 50+3 kf2781974 2026-07-31 9/450 2026-08-04 03:56 by kf2781974
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 7/350 2026-08-04 03:35 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 12/600 2026-08-04 03:17 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 16/800 2026-08-03 12:23 by fuweiguochen
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[教师之家] 基础研究怎么拉横向,学校到款任务越来越多,难以完成 拉横向,都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 12/600 2026-08-03 08:22 by syl200707
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液,是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
请填处理意见