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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳时，只有泳道两边发亮，中间没有条带
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尚慕寒

铜虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳时，只有泳道两边发亮，中间没有条带

如图，跑的是总RNA，在28S的地方，只有泳道两侧发亮，中间却没有条带。
应该不是降解的原因，因为之前质粒酶切的时候也遇到过这种情况，我把中间没有条带的地方切下来纯化之后，跑出来的条带是很亮的，所以中间不亮的地方实际有东西，但没有染上色。质粒的图不在手边，如果需要的话我下次发上来。请高手指点下有可能是什么情况，万分感谢。
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    • 2012-09-12 22:02:10, 21.51 K

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高山仰止，景行行止，虽不能至，心向往之。
1楼 2012-09-12 22:04:38
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回帖置顶 ( 共有1个 )

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-13 14:35:56
尚慕寒: 回帖置顶 2012-09-15 08:45:15
尚慕寒: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 十分感谢，我把上样量做了一个梯度，然后加大了EB的用量，结果跑的胶图非常漂亮！感谢！ 2012-09-15 08:46:42
提的RNA结果不错了，造成这个的原因是：上样量太多，核酸带的是负电核，而染色剂如EB带的是正电荷，电荷方向相反，如果样本量太多，则后面的条带容易出现这样的状况，解决办法：减少上样量。其它的都是正常的。
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6楼2012-09-13 14:04:26
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普通回帖

ybs007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是用多少V跑的？ 感觉电压有点儿大呢
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平生我自知
2楼2012-09-12 22:58:04
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不亮是因为浓度低的原因，好的条带就像你中间那条一样
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3楼2012-09-13 00:03:51
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31569218

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个已经降解，重新提吧
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爱之深痛之切
4楼2012-09-13 09:12:04
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shen_41745

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你跑胶出现这种弧形的带，一般来说，要么是你胶制的不均匀，要么是你的电泳缓冲液需要换啦！！！你没发现你的Marker也有这种现象吗！！！
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5楼2012-09-13 12:39:58
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zoopera

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电压大了，把电压调低一些
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7楼2012-09-14 16:46:32
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小叔叔的爱

新虫 (初入文坛)
我跑的回收，也是这种情况，咋个搞嘛
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8楼2014-03-02 21:01:45
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吃啄木鸟

新虫 (初入文坛)
我的也这样啊
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9楼2016-07-06 21:27:55
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Melody楊楊楊

新虫 (初入文坛)
您好！请问您知道原因了吗？我也遇到了好几次这样的现象，我认为不是降解，如果降解的话，不会在大小正确的地方出现膨大和亮边，所以目的条带还是在的，只是不知为何显示不出来，是浓度过高，染料有限，被同一泳道下面的那条带用完了吗，降低浓度是不是会好一些？
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10楼2019-12-11 21:09:31
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