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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳，条带特别浅，Marker的条带也比较浅
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳，条带特别浅，Marker的条带也比较浅 已有1人参与

各位大侠，
    最近跑琼脂糖凝胶电泳，条带特别浅，Marker的条带也很浅。以前好好的，突然就这样了，不知哪里出问题了，求指教啊
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1楼 2012-12-04 14:54:08
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是加的量少了、电压不稳、或者其他，建议再跑一次看看
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2楼2012-12-04 15:12:29
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weiyasong at 2012-12-04 15:12:29
是不是加的量少了、电压不稳、或者其他，建议再跑一次看看

加的量和原来一样，没有改变什么条件，是不是EB出问题
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3楼2012-12-04 15:45:01
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 姜红馨520 at 2012-12-04 15:45:01
加的量和原来一样，没有改变什么条件，是不是EB出问题...

这个真不好说，建议再做一次看看
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4楼2012-12-04 17:14:15
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 姜红馨520 at 2012-12-04 15:45:01
加的量和原来一样，没有改变什么条件，是不是EB出问题...

我觉得是EB和拍照是曝光度两方面的问题，EB加多一些，曝光强一些，就好了
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2012-12-04 18:48:06
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wangqi20092

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-12-04 21:15:58
检测你的marker是不是降解了：让别人用一次，或者借别人的用一次，两个marker点在一个胶上；借别人的marker和你的marker点在你自己制的的胶上，看是不是胶有问题（同时也可以EB染色的问题）；如果胶合marker都没问题的话，再解决PCR条带弱的问题，这就需要知道你的PCR条件了，弱无非就是模版少，退火温度不合适这两个主要原因。具体可以联系我：380270985
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6楼2012-12-04 20:26:22
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姜红馨520

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wangqi20092 at 2012-12-04 20:26:22
检测你的marker是不是降解了：让别人用一次，或者借别人的用一次，两个marker点在一个胶上；借别人的marker和你的marker点在你自己制的的胶上，看是不是胶有问题（同时也可以EB染色的问题）；如果胶合marker都没问题 ...

谢谢你
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7楼2012-12-05 15:22:16
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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)
我也是最近开始提取DNA的，情况和你差不多，老是降解。条带很浅，maker也浅。不知道你现在解决了没呢？求回复。
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8楼2012-12-05 21:23:52
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果条带都很暗的话，可能是曝光的问题吧，调一下成像仪
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9楼2012-12-06 08:43:23
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lethebai

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果Marker都很浅，那有可能是制胶的问题，也有可能是缓冲液和曝光时间的问题。我曾经有过条带不好的情况，试着把电泳槽清理了下，重配了缓冲液，再跑胶看条带就正常了。你可以试试
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10楼2012-12-06 11:04:19
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