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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳结果在紫外成像下越来越浅
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junyanski

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖凝胶电泳结果在紫外成像下越来越浅 已有7人参与

请问各位大侠 这是怎么回事啊 开始看到marker及条带都清楚地 慢慢marker就看不到了 最后连目的片段也变浅了 做的是重组质粒的pcr鉴定 16sRNA的引物
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1楼 2011-01-01 20:25:44
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xiaoee2728

金虫 (小有名气)
★ ★
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-01 21:21:53
引用回帖:
Originally posted by junyanski at 2011-01-01 20:25:44:
请问各位大侠 这是怎么回事啊 开始看到marker及条带都清楚地 慢慢marker就看不到了 最后连目的片段也变浅了 做的是重组质粒的pcr鉴定 16sRNA的引物

会不会是曝光时间太长了，缩短时间试试，或者调一下图片的对比度
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似水流年
2楼2011-01-01 20:29:25
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junyanski

新虫 (初入文坛)
回复2楼 感觉不像 曝光时间和对比度都没有改变 并且用肉眼看得结果也是一致的 会不会是荧光淬灭了？
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3楼2011-01-01 20:33:55
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jerry110

新虫 (小有名气)
★
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过去上实验课听老师说紫外灯下照射时间长夜会照坏的，我觉得看的话，凝胶系统拍完照再去分析。
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4楼2011-01-01 20:44:36
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
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1949stone(金币+2):谢谢交流 2011-01-01 22:33:13
紫外会淬灭EB
凡是这种激发荧光的，都会有这样的现象
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5楼2011-01-01 21:47:29
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jhon86

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
Originally posted by junyanski at 2011-01-01 20:25:44:
请问各位大侠 这是怎么回事啊 开始看到marker及条带都清楚地 慢慢marker就看不到了 最后连目的片段也变浅了 做的是重组质粒的pcr鉴定 16sRNA的引物

这是我的见解：荧光猝灭有部分原因，还有就是的你重组质粒见UV会部分分解……
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6楼2011-01-01 22:39:19
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你看了多少时间啊？  扫个胶 照相了再对着电脑看啊。。。
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7楼2011-01-01 22:52:54
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by jhon86 at 2011-01-01 22:39:19:

这是我的见解：荧光猝灭有部分原因，还有就是的你重组质粒见UV会部分分解……

UV会使DNA形成嘧啶二聚体，不会降解
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8楼2011-01-02 09:48:19
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
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是不是还有个原因，扩散。
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9楼2011-01-02 10:01:21
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