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djn880607

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】急！！！琼脂糖凝胶电泳的问题，跑不出条带了！！

这几天的胶总是跑不出理想的图。琼脂糖是新买的，染液用的是SYBR GREEN，也是新买的，缓冲液用的是0.5X的TAE。恒压100V，胶是1%。我跑的是PCR产物，marker的条带越来越少，现在连marker都跑不出来，求助一下大家，看看是哪里出问题了？




[ Last edited by djn880607 on 2011-4-8 at 16:31 ]
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1楼 2011-04-08 16:17:42
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★
1949stone(金币+2): 似的 2011-04-08 19:01:39
首先，不知道你们实验室为啥习惯用0.5 TAE，TAE一般都用1 TAE，因为其本身缓冲能力就比TBE弱，跑几次之后TAE缓冲能力都没有了，DNA跑不动。

第二，可以检查一下电极丝是不是接触不良了。
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2楼2011-04-08 16:53:41
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另一个天堂

金虫 (小有名气)
是不是缓冲液的问题。我一般用0.5倍TBE。或者换一种染液试试
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3楼2011-04-08 17:46:07
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
染料换个试试吧~~~
我们用的是1*的~~~
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4楼2011-04-08 17:52:25
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-04-09 08:46:26
也有可能marker 不行了~~~
我们以前的marker1 点1就可以了~~~
最近买的都得点5或者6 才可以~~~
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5楼2011-04-08 17:54:03
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): 鼓励分享实际经验 2011-04-10 00:18:27
本帖内容被屏蔽
6楼2011-04-08 19:33:17
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jjlbest

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-04-09 08:46:44
是不是染料的问题，我们知道DNA分子量越大越容易结合染料，所以染料就多，而当分子量小的话，结合的就少，楼主是不是可以增加染料的浓度或染色时间试试呢？仅是个人观点。
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7楼2011-04-08 19:43:22
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天使托

专家顾问 (职业作家)
核酸染料有问题！
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8楼2011-04-08 20:10:35
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djn880607

新虫 (初入文坛)
怎么才能检测染料是不是失效了呢?
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9楼2011-04-09 22:48:27
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