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流感病毒RT-PCR,电泳老是跑不出条带~~~纠结!
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从流感病毒感染的MDCK细胞中提取RNA,反转录cDNA后进行PCR扩增,跑电泳分析条带。目地序列为229bp.开始4月份条带很明显清晰,后来6月份重提时,怎么也出不来目的条带,不是非特异扩增就是弥散,改变了温度52,54,56,58,及酶等用量均无法出来目的条带。万分纠结,还望高人指点~~~ 附图,第一张是原来4月较好结果,后面为最近电泳图(后面较清晰条带为GADPH) |
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longlikun
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