应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 毛细管电泳分离ONPG、ONPG-Gal、ONPG-Gal-Gal
41/1返回列表
查看: 829  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

marc0907

金虫 (小有名气)

[交流] 毛细管电泳分离ONPG、ONPG-Gal、ONPG-Gal-Gal

各位gg，jj，
      小弟想通过毛细管电泳分离onp、ONPG、ONPG-Gal、ONPG-Gal-Gal这四种物质，如何分离，小弟曾尝试了一下，用的条件是pH2.5 磷酸buffer，电压20KV，在214nm下检测紫外吸收，但不幸的是，小弟跑了45分钟也未见有峰出现，不知是什么原因。是不是要在buffer 里面加入硼酸和SDS后回好一些，另外ph调高一些是不是不会好一些！请大家不吝赐教，小弟在此不胜感激！btw，不知道大家用的内标物是什么！我看文献用的是pnp-acetate！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-12-14 11:13:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marc0907

金虫 (小有名气)
给力啊！顶起！
回复此楼
2楼2011-12-15 08:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿斯楞

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
在你的电泳条件下onp、ONPG、ONPG-Gal、ONPG-Gal-Gal 4种待分析物，无法电离，不会带有净电荷，无法实现分离，本来应该和电渗流一起流出，但你使用的buffer 的pH是2.5，此时电渗流又非常之小（如果你pH调的有些偏差，可能小于2.5，那电渗流会更小），所以导致你45min内没看到色谱峰。试试下面的方法：
1.使用10mM硼砂buffer，pH11或11.5，看看这样的pH能否使苯环上的糖中的羟基解离（这个我不太确定，所以得你自己试试）。
2.如果1不行，只能试试MECC了，用含50mMSDS的pH9.0的硼砂缓冲液试试。
3.如果1、2都不行，用含160mM SDS的pH2.0的磷酸缓冲液，但是一定要翻转电压。就是要从负极进样，使用负电压运行。至于原理我不在此解释，如果实验能做出来，自己看书弄清楚原理。
祝你好运
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-12-30 09:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
marc09073楼
2011-12-19 10:57   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 marc0907 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭