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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA电泳图 好奇怪 什么原因呀
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yanhuazh2008

金虫 (小有名气)

[求助] RNA电泳图 好奇怪 什么原因呀

今天又提了一次RNA  结果好惨呀 不知道怎么造成的 希望有经验的各位指点

室温放置1小时后跑的电泳



提完之后立刻跑的电泳
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1楼 2012-06-05 19:11:14
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回帖置顶 ( 共有1个 )

yangbin1

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 回帖置顶 2012-06-06 19:07:31
西瓜: 金币+1, Good！ 2012-06-06 19:07:39
提取RNA的两个秘诀：低温和迅速。在最短的时间内完成，这样减少污染的几率。在低温下进行，防止RNA降解。祝好运！
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10楼2012-06-06 13:59:05
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
降解很严重，并且有一点基因组污染。
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2楼2012-06-05 20:38:15
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yanhuazh2008

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 超然渡陈 at 2012-06-05 20:38:15
降解很严重，并且有一点基因组污染。

都没有条带 但看5S也不是很亮 弥散很严重 可是操作过程已经很注意了
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3楼2012-06-05 22:10:42
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-06 13:52:42
yanhuazh2008: 金币+2, ★有帮助 2012-06-10 10:25:21
本帖内容被屏蔽
4楼2012-06-05 22:37:48
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yanhuazh2008

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-06-05 22:37:48
首先，你的点样孔很亮，说明你里面的蛋白质没洗干净。
其次，你的带很弥散，说明其中降解很严重，可能存在盐污染；
你没把OD值给我们看看，让我们帮你分析下什么原因， 提RNA是很需要注意操作的技术，不能着急，注 ...

谢谢您的回帖 之前做的降解严重的只是5S很亮 没有弥散 这让我很不解
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5楼2012-06-05 23:51:37
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fwks3518

木虫 (正式写手)
260/280是多少？
如果只看电泳图的话，应该是有蛋白质和基因组污染。如果你的260/280会比较低
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6楼2012-06-06 08:50:45
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-06-07 13:43:38
RNA降解了
二是应该有污染
你操作过程中一定要多加注意啊
提一次那么费劲
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7楼2012-06-06 11:38:14
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

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感觉应该是降解的原因。
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蓝精灵
8楼2012-06-06 12:21:57
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-06 13:56:58
根据你刚提之后立即跑的电泳图，除了第二条泳道似乎降解比较严重以外，其他泳道的样品似乎降解状况不是很严重的。你这个是粗提RNA？是不是还没用DNase（DNA酶）消化过？我怀疑泳道里的弥散物是基因组DNA的残留。
另外，为什么提取的RNA要室温放置1h，有意要让RNA降解吗？提出来的RNA立即进行后续实验，或者超低温冻存不行吗？
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9楼2012-06-06 13:55:20
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