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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA电泳图谱
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bianyu

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】RNA电泳图谱 已有8人参与

向各位请教有关RNA电泳的问题，我是初学者，对电泳图中的问题知之甚少
分别附两张图，希望大家对其做下评判！谢谢
期待大家的答复！
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1楼 2011-03-06 14:23:41
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cjl2fl

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
前面两张还可以，但后面的条带模糊，不好看。是不是胶有问题？
有的跑歪了点，点样要注意。
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2楼2011-03-06 15:24:46
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bianyu

铜虫 (正式写手)
我是用普通的琼脂糖胶，歪的话是因为拍的时候放歪了
我想知道造成第三张的原因大概有哪些，不知有没有同学也遇到过这种情况？
第四张是不是说明RNA都降解了？

另外，点样要注意什么啊？
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3楼2011-03-06 16:51:12
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
第三张应该是胶的问题，不能肯定是降解了；但是第四张估计是降解了～～～
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4楼2011-03-06 17:07:41
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翱宇

禁虫 (正式写手)

将军
★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:55:20
RNA跑琼脂糖胶，胶需要用新配置的，电泳缓冲液也要用新的，而且用RNA上样缓冲液（单独配置的），楼主都没有问题吧！
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5楼2011-03-06 18:37:04
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bianyu

铜虫 (正式写手)
是啊都是新配的！用的是10* loading buffer，我查的是用于RNA 的
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6楼2011-03-06 20:25:30
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dingxiuying

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
第三张：可能是配胶用的buffer和配制样品用的buffer不一致。要注意胶、样品和电泳缓冲液用的buffer都要一致。
第四张：降解了。而且样品浓度过大。
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我喜欢默默地被你注视默默地注视着你，我喜欢深深地被你爱着深深地爱着你
7楼2011-03-07 16:12:56
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励分享经验 2011-03-07 19:55:39
我自己跑RNA时的做法：
点样2-5ul就已经足够了。
缓冲液和配胶的缓冲液要一致，而且都换成新的
跑胶用200V，跑出点样孔1CM左右就可以看胶了，要不跑着跑着胶里的RNA自己也降解了，到时结果就不太可靠了
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你的日子如何，你的力量也必如何！
8楼2011-03-07 16:19:50
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
前面两张勉强可以，34两张拖尾太严重了，缓冲液有问题吧，建议换下
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风雪夜归人
9楼2011-03-07 16:35:09
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bianyu

铜虫 (正式写手)
嗯，我是120跑了20min呢！其他缓冲液都是新配制的！上样量根据OD测得的浓度换算的大概1-2.5ug的样子
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10楼2011-03-08 09:55:20
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